Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Yumurtalıkları canlı Drosophila sineklerinden izole etmek için, uyuşturulmuş bir dişiyi önceden ısıtılmış böcek diseksiyon ortamı ile dolu üç diseksiyon kuyusundan birine taşıyarak başlayın.
Diseksiyon mikroskobu altında, karnı torakstan ayırın. Sonra, karnı yeni bir kuyuya taşıyın. Yumurtalıkları izole etmek için, karnı arka uçta tutun ve üreme organlarını dikkatlice kazıyın. Son olarak, yumurtalıkları taze bir kuyuya aktarın. Bu adımdan sonra, tüm yumurtalığı kullanabilir veya bileşen yapılarına daha fazla parçalayabilirsiniz.
Her Drosophila yumurtalığı, artan olgunluk seviyelerine sahip bir yumurta odası zincirinden oluşan birkaç yumurtalıktan oluşur. Yumurtalıkları serbest etmek için, yumurtalığı opak arka uçta sabitleyin ve yumurtalıklar düzgün bir şekilde ayrılana kadar koruyucu kılıfi yumurtalık çevresinden dikkatlice alay edin.
Örnek protokolde Drosophila yumurtalıklarının canlı ve sabit doku mikroskopisinde kullanılmak üzere diseksiyonu gösterilmiştir.
- Metin protokolüne göre beş uyuşturulmuş dişi sinek sıraladıktan sonra, diseksiyon mikroskobu altında, toraksı karından ayırmak için iki çift tostipi kullanın. Daha sonra, karınları dikkatlice yemeğin ikinci kuyusuna aktarın.
Daha sonra, tek bir yumurtalığı opak arka ucundan tutmak için forsepsleri kullanın ve sataşmak veya sabitlemek için yemeğin üçüncü kuyusuna dikkatlice hareket ettirin. Arka ucunu tutmak için bir çift forseps kullanarak ve bir alay iğnesini arka uçtan ön uca hafifçe süpürerek koruyucu kılıfı yumurtalıkların etrafından dikkatlice alay edin.
