Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

A subscription to JoVE is required to view this content.

 
Click here for the English version

האי Assay: שיטת תפוקה גבוהה כדי להעריך את התנהגותו של דרוזופילה לוקומוטור

Article

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

- בדיקת האי מורכבת מפלטפורמה לבנה מוגבהת במגש של מי סבון, מכוסה בקופסה שקופה עם צד פתוח אחד. מצלמה מעל התיבה מתעדת תמונות תקורה של הפלטפורמה, ואורות ממוקמים כדי להבטיח אפילו תאורה של האזור.

כדי לטעון את הזבובים בזירה, הקש על בקבוקון על משטח שטוח כדי להביא את כל הזבובים לתחתית. ברצף מהיר, הסר את תקע הבקבוקון, להפוך את הבקבוקון מעל, ולהקיש על הקצה הפתוח של הבקבוקון על הפלטפורמה כדי לדפוק את כל הזבובים החוצה באותו זמן.

הנבדקים מוגבלים לקופסה, ואלה שנחתים על מי הסבון צוללים במהירות מכיוון שסבון מקטין את מתח פני השטח של המים.

בפרוטוקול דוגמה זה, נראה התקנה של מבחני האי התואמים לניתוח תמונה אוטומטי למחצה.

- ראשית, להכין מינימום של שלושה בקבוקונים לכל מצב ניסיוני כמו משכפלים ביולוגיים. כל בקבוקון צריך להכיל כ 15 זבובים מאותו המין וגיל דומה. חשוב, הזבובים חייבים להיות כנפיים שלמות.

צור את התיקיות כדי לאחסן את הניסויים. צור אותן במבנה ספריה המוגדר על-ידי התנאים והשכפולים. אם, לדוגמה, בניסוי יש שני גנוטיפים עם חמישה שכפולים כל אחד, ולאחר מכן צור תיקיה ראשית עם תאריך הניסוי, ובתיקיה זו, צור תיקיית משנה אחת עבור כל גנוטיפ.

לאחר מכן, הקימו את מנגנון הבדיקה.

כדי להאיר את הפלטפורמה, מקם מנורה מגניבה, כגון נוריות רגילות של 12 וולט, מעליה.

במחשב, פתח את תוכנת הקלטת התמונה. ממערכת התפריטים, בחר את מצלמת האינטרנט המתאימה כהתקן הלכידה.

לאחר מכן, התאם את כיוונון הסרט לשגות זמן כדי לשמור את הסרטים כקבצי AVI. לאחר מכן, דפדף אל הספריה שבה יש לשמור את הנתונים ולהגדיר את שם הסרט.

לדחיסה של נתוני התמונה, בחרו בקוד Intel IYUV. קבעו את מהירות ההקלטה למסגרת אחת כל 0.1 שניות והתאימו את קצב ההשמעה המתאים ל-10 תמונות בשנייה.

לבסוף, עבור אל ההגדרה מתקדם ובחר צור תמונת BNP עבור כל מסגרת שנלכדה. לאחר מכן, אתר את אותה ספריה שבחרת לארח את קבצי AVI ולחץ על אישור.

לפני שתתחיל, ודא שהאי ריק ונקי. לאחר מכן, התחל את ההקלטה בממשק התמונה של זמן לשגות של תוכנת הקלטת התמונה.

קח בקבוקון המכיל זבובים והקש עליו פעמיים או שלוש כדי להפיל את כל הזבובים לתחתית. לאחר מכן, להסיר במהירות את התקע מן הבקבוקון במרץ הקש על הזבובים על הפלטפורמה.

תן את הזבובים עד 30 שניות לעזוב את הפלטפורמה.

לפני שתמשיך לניסוי הבא, ודא להגדיר מחדש את הספריה שבה יש לאחסן את ערכת הנתונים הבאה.

Tags

ערך ריק הנפקה
Read Article

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter