Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Börja med att cohousing ett visst antal manliga och kvinnliga Drosophila melanogaster fruktflugor i en flaska som innehåller majsmjöl medium. Detta möjliggör en konsekvent densitet av avkommor.
Låt honflugorna lägga ägg. Sedan ta bort de vuxna flugorna. Äggen blir larver, puppar och slutligen flyger vuxna inom ett spann av 10 dagar. Nya flugor som dyker upp tidigare än deras kohort bör tas bort före dag 9. Dela de nu synkroniserade flugorna i grupper för kontroll- och experimentella förhållanden.
Efter flera dagar, separera flugorna efter kön i grupper. Placera lika många flugor i motsvarande experimentella tillstånd. Var tredje dag, överför de levande flugorna till en ny flaska och registrera antalet döda flugor. Upprepa denna process tills alla flugor har dött.
Efter minst tre replikatexperiment, plotta den genomsnittliga andelen överlevande flugor per dag för att generera genomsnittliga överlevnadskurvor för varje tillstånd.
- I livslängdsprotokollet, sätt först upp 20 flaskor med åtta honor och fyra hanar, var och en fylld med 10 milliliter majsmjölsmat och inhysa dem vid 25 grader Celsius.
Efter 16 till 24 timmar, dela på 250 endags gamla vuxna flugor av båda könen i fyra grupper under lätt koldioxidbedövande och överför dem till 250 milliliter flaskor som innehåller vuxen medelmat, tre kompletterade med olika EDC-koncentrationer, och en med EE2-lösningsmedlet ensamt. där antalet döda flugor subtraheras från antalet överlevande flugor från den tidigare överföringen så att antalet överlevande vid varje överföring automatiskt erhålls.
Efter tre dagar, överför flugorna utan anestesi till nya flaskor som innehåller motsvarande mat samtidigt och kontrollera om de är döda.
