성인 Drosophila 두뇌 장착: 공초점 이미징에 대 한 슬라이드를 준비 하는 방법

- 양전하 현미경 슬라이드에서, Drosophila 뇌가 장착 할 수있는 공간을 만들기 위해 그들 사이의 충분한 거리의 두 개의 커버 슬립을 부착. 스테레오 현미경에서, 조직의 음전하는 뇌가 슬라이드의 표면에 긍정적 인 전하를 준수하는 데 도움이 될 것입니다.

안테나 로브가 위쪽을 향하도록 그리드 패턴의 슬라이드에 뇌의 정확한 위치를 허용하도록 과도한 장착 매체를 제거한 다음, 세 번째 커버 슬립을 어지러워 두 개의 커버 슬립을 연결하여 뇌를 덮습니다.

캐비티를 채우기 위해, 캐비티의 가장자리에 한 번에 중간 1 방울을 장착하고 뇌를 방해하지 않도록 모세관 운동에 의해 확산 되도록 하십시오.

매니큐어로 구멍을 밀봉하고, 얼룩진 조직의 형광을 유지하기 위해 어둠 속에서 음의 섭씨 20도에 저장합니다.

예제 프로토콜에서, 우리는 면역 염색한 뉴런의 공초점 화상 진찰을 위한 Drosophila 두뇌를 탑재할 것입니다.

- 두뇌를 장착하려면 브리지 슬라이드를 구축하십시오. 위치 2 개의 베이스 커버는 양전하 슬라이드에서 약 1 센티미터 떨어져 미끄러져 양충전 된 면이 향하도록하십시오.

다음으로, 스테레오 현미경과 파이펫 뇌 아래에 슬라이드를 표지 전표 사이의 공간에 매체에 배치합니다.

다음으로, 슬라이드에서 여분의 장착 미디어를 흡인, 뇌를 피하기 위해 주의. 다음, 남은 과잉 장착 매체를 멀리 심지. 이것은 뇌가 더 정확하게 배치 할 수 있습니다.

그런 다음, 커버슬립을 뇌에 놓고, 손톱 폴리시큐어를 사용하여 베이스 커버 슬립에 부착된 상단 커버 슬립의 가장자리를 밀봉합니다.

이제 중앙 캐비티를 신선한 장착 매체 드롭 와이즈로 적재하여 모세관 작용에 의해 커버 슬립 아래에 미디어를 그릴 수 있게 합니다.