Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- На положительно заряженном микроскопе слайд, придерживаться двух крышки скользит с достаточным расстоянием между ними, чтобы создать пространство для мозга Дрозофилы, чтобы быть установлены. Под стерео микроскопом, пипетка мозги в монтаже среды в этом пространстве. Отрицательный заряд ткани поможет мозгу придерживаться положительного заряда на поверхности слайда.
Удалите избыток монтажа среды, чтобы обеспечить точное позиционирование мозга на слайде в сетке картины с антенными долями вверх, а затем мост две крышки скользит, придерживаясь третьей крышкой скольжения поперек, чтобы покрыть мозги.
Чтобы заполнить полость, поместите монтажную среду по одной капле за раз в край полости, и дайте ей распространиться капиллярным движением так, чтобы она не мешала мозгу.
Печать полости с лаком для ногтей, и хранить при отрицательном 20 градусов по Цельсию в темноте, чтобы сохранить флуоресценцию окрашенных тканей.
В примере протокола, мы будем монтировать мозг Drosophila для конфокальной визуализации иммуноогромных нейронов.
- Чтобы смонтировать мозги, построить мост слайд. Позиция две базы охватывает скользит примерно на один сантиметр друг от друга на положительно заряженных слайд. Убедитесь, что положительно заряженная сторона лицом вверх. Затем придерживаться крышки скользит на слайд с лаком для ногтей, и пусть польский сухой полностью, прежде чем приступить.
Далее поместите слайд под стерео микроскопом и пипетки мозги в среднем в пространство между крышкой скользит.
Далее, аспирировать дополнительные монтажные средства со слайда, будьте осторожны, чтобы избежать мозгов. Затем, фитиль от оставшихся избыточных монтажных средств. Это позволит мозгу быть расположены более точно.
Затем поместите крышку скольжения по мозгам, и использовать лак для ногтей, чтобы запечатать края верхней крышки скольжения, которые прикреплены к базовой крышке скользит.
Теперь загрузите центральную полость свежими монтажными средствами массовой информации, что позволит средствам массовой информации быть нарисованными под крышкой под капиллярным действием.
