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Encyclopedia of Experiments: Biology

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化学干燥:扫描电子显微镜 (SEM) 的生物样品制备

 
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化学干燥:扫描电子显微镜 (SEM) 的生物样品制备

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- 首先脱水干燥固定样品开始,以减少常规扫描电子显微镜(SEM)的运行压力降低去除气体液态引起的样品失真

使样品脱水请在水中增加乙醇浓度清洗直到达到100%乙醇然后乙醇中的化学干燥重复过程直到样品干燥剂清洗。 样品干燥转移到蒸发盘上。 最少的额外干燥盖住让它烟雾干燥过夜。

接下来,使用准备好样品安装显微镜存根顶部最后,存根的边缘然后存根边缘涂抹到每个样品上,以减少过多电子积累可能导致不良图像文物。

在这个实验中,蝇,蝇,果蝇准备使用干燥HMDS进行SEM分析

- 为了准备德罗索菲拉梅拉诺加斯特,4摄氏度下将麻醉苍蝇浸入1毫升固定2小时确保它们完全被淹没。

使用玻璃移液器去除固定物。1.5毫升微中福格清洗固定 Drosophila样品温下1 毫升 0.1摩尔磷酸盐缓冲 pH 7.2洗涤器,10 分钟。 使用玻璃移液器去除每次洗涤,小心不要移除样品。

然后样品微富格体积1毫升,使用分级乙醇系列,每次10分钟使用玻璃移液器去除每次洗涤,小心不要去除样品。 样品保存在1.5毫升微中福格,只需足够的100%乙醇覆盖它。

使用 HMDS苍蝇进行化学干燥,首先,12 HMDS溶液和 100% 乙醇解决方案替换 100% 乙醇溶液 20 分钟。然后 2 1 个 HMDS 溶液 100%乙醇替换该解决方案 20 分钟。最后, 100% HMDS 替换解决方案 20分钟,然后重复此过程一次。

转移样本, 这是一个1.5毫升的微中心管HMDS,次性称重盘。 足够新鲜100% HMDS 替换 100% HMDS 覆盖样品。 样品直接放入松动的盖子(如盒子干燥防止碎屑落在样品允许干燥 12 24 小时。

安装德罗索菲拉标记安装存根底部使用精密的钳子苍蝇置于所需的位置解剖显微镜固定存根顶部粘合剂标签上。存根的外导银胶粘剂

使用牙签苍蝇连接起来,确保导电性,确保油漆不会触及所需的成像区域。 存根放在存根支架盒中,然后打开存根支架放在干燥器使干燥至少个小时。

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空值,问题,
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