成人 ショウジョウバエ の注射:化合物または標識の送達方法

-針引き機を使って薄肉のガラス毛細血管を引っ張って先細りの注射針を準備する。顕微鏡の下に針を持って先端を折り、開口部が必要以上に傷つけずに成体のハエキューティクルを突き刺すのに十分な大きさであることを確認してください。無菌染料と塩バッファー溶液を針に積み込み、ステージマイクロメーターの鉱物油の滴に排出することによって注入量を測定します。 設定に応じて設定します。

注射液で針を積み込んで注入ノズルに取り付ける。CO2でハエを麻酔し、麻酔を付けるCO2フライパッドに並べる。ハエが正しい向きになったら、注射を進める。

- 薄壁のガラス毛細血管を針の引き手で引っ張った後、マイクロメーターを使って針を顕微鏡の下に持ち、5番の細かい点のステンレス製のピンセットを使って先端を100マイクロメートルの先端直径に割り込みます。

1ミリリットル当たり10マイクロリットルをパラフィルムの小さな正方形に分配し、液体を針に引き込みます。 注射器ノズルに針を取り付け、フライパッド上の指定された領域に沿って麻酔付きハエを並べ、腹側を上に向け、ヘッドをパッドの前面に向けます。 バイアルの時間。

次に、0.4%のトリパンブルー溶液で新しい針をロードし、空気圧インジェクターを「ゲート」に設定して、一定の空気の流れが液体を針から押し出すことができます。 最初の注射の30分後、腹部がいっぱいになるまでトリパンブルーで各フライ腹部を注入し、電気テープ腹側を下にして顕微鏡スライドにハエを取り付け、翼をフライの側面に押し付けてテープに固定します。