Smaakvoorkeurstest: een methode voor het meten van voedingsgedrag in Drosophila

- Om de smaakvoorkeurstest uit te voeren, gebruikt u een kamer, bijvoorbeeld een Petrischaal verdeeld in gelijke secties. Als u de keuze tussen twee oplossingen van verschillende smaken meet, labelt u de ene in rood en de andere in blauw met behulp van smakeloze voedselkleurstoffen. Plaats vervolgens gelijkmatig verdeelde druppels van elke oplossing langs de rand van de schaal over afwisselende secties.

Voeg nu verdoofde en eerder uitgehongerde vliegen toe aan het midden van de kamer en bedek het gerecht. Voer het experiment in het donker uit om potentiële kleurbias uit te sluiten en incubeer op 25 graden Celsius over een bepaalde periode. Wanneer ze de keuze hebben tussen twee oplossingen, geven meer proefpersonen de voorkeur aan oplossingen waarvan de smaak aantrekkelijker is, bijvoorbeeld zoet, terwijl ze aversieve opties zoals bittere oplossingen vermijden. Stop het experiment door de kamer naar een vriezer te verplaatsen.

Om het voedingsgedrag en de smaakvoorkeur te meten, vergelijkt u het aantal vliegen met verschillende gekleurde buiken. In het voorbeeldprotocol zien we een demonstratie van de smaakvoorkeurstest die de keuze tussen verschillende sacharose-oplossingen meet.

- Om het experiment te beginnen, verzadig een wattenbolletje met water aan de onderkant van een standaard vliegenflacon. Verzamel vervolgens vliegen in sets van 100 dieren op een CO2-pad en voeg vervolgens de vliegen toe aan een voorbereide flacon. Gebruik een wattenbolletje om de flacons gesloten te houden. Plaats vervolgens de flacons op hun kant in een milieuvriendelijke incubator. Bereid de controle-smaakstof van 1 millimolar sucrose door 10 microliters van 100 millimolar te combineren.

Bereid vervolgens de experimentele smaakstof van 5 millimolar sucrose voor. Maak vervolgens de testkamers door een plastic Petrischaal van 100 millimeter bij 15 millimeter te verkrijgen en drie 10 microliter druppels controle tastant zo dicht mogelijk bij de rand van de plaat te plaatsen op de 12 uur positie. Plaats op de 3 uur positie drie 10 microliter druppels experimentele tastant zo dicht mogelijk bij de rand van de plaat.

Vervolgens leegt u een flacon van 100 uitgehongerde vliegen op een CO2-pad net lang genoeg om alle dieren te verdoven. Borstel de dieren in het midden van een voorbereide testkamer en bedek deze met het deksel van de schaal. Plaats de testkamer in een ondoorzichtige kartonnen doos. Label vervolgens de buitenkant van de doos met de conditie en het genotype dat wordt getest. Verplaats de hele opstelling in een incubator. Plaats na twee uur de testkamers, nog steeds in kartonnen dozen, direct in een negatieve.