Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

A subscription to JoVE is required to view this content.

CApillary FEeder (CAFE) Assay

 
Click here for the English version

CApillary FEeder (CAFE) Assay: שיטה למעקב אחר צריכת מזון והעדפה בדרוסופילה

Article

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

- כדי להתכונן למאכיל נימי, או CAFE assay, הכנס נימי זכוכית מדורגים או מסומנים מלאים במזון צבעוני, נוזלי, הקצה התחתון הראשון, דרך טיפים פיפטה על גבי בקבוקון ניסיוני מראש.

סמן את רמת ההתחלה של המניסקוס בכל נימי. לאחר מכן שכן את הבקבוקונים בסביבה מבוקרת טמפרטורה, לחות ואור למשך הניסוי תוך החלפת נימים לפי הצורך. במהלך בדיקת CAFE, זבובים ניידים אינם מרוסנים ויש להם גישה חופשית לקצה הפתוח התחתון של המיקרופיפט.

כדי לעקוב אחר צריכת מזון והעדפה לתקופת זמן מוגדרת, רשום את הירידה של המניסקוס מהסימן ההתחלתי לרמה בסוף אותה תקופה מנחמים זכאים. בפרוטוקול הדוגמה, נראה את מבחני CAFE עם ההרכבה שונה כדי להשיג אידוי מופחת מן נימים מלאים בנוזל.

- בזהירות להסיר את קצה פיפטה כי הוא סוגר את אחד הפתחים החיצוניים, ולהכניס נימי זכוכית מלא, הקצה התחתון הראשון.

לאחר מכן, הנח את הקצוות נימי בתוך כל הבקבוקונים באותה רמה, 3 עד 4 ס"מ מהמכסה.

מניחים מבחני CAFE מוכנים לתוך קופסת פלסטיק עם שיבוץ מרושת. השתמש באנג ספוג כדי להחיל 100 microliters של מים מתוקים כל 24 שעות כדי לשמור על לחות קבועה בתוך assay. השתמש ארבעה בקבוקונים נפרדים מלאים 30 מיליליטר של H2O מזוקק כפול כמו מכשירי לחות, ומניחים אותם ליד מבחני CAFE בתיבת הפלסטיק.

מכסים את קופסת הפלסטיק כדי ליצור סביבה מבוקרת לחות במהלך הניסוי.

בסוף ההסמכה ולפני החלפת נימי, לשמור על בדיקת CAFE במצב זקוף.

למדוד את הירידה של המניסקוס. ואז להשליך את נימים ישנים. ואז להסיר בזהירות את נימים מן הבדיקה, ולאחסן אותם לאיסוף נתונים.

לאחר הניסוי, לפרק את ההתקנה, ולשטוף את הבקבוקונים, מכסים, באנגים ספוג באמבט סבון.

Tags

ערך ריק הנפקה
Read Article

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter