拉瓦尔淋巴腺解剖：分离 德罗索菲拉 血细胞产生器官

- 德罗索菲拉梅拉诺加斯特幼虫淋巴腺负责生产血细胞，或在幼虫血淋巴中循环的血细胞。要识别淋巴腺，首先找到躯干血管，或心脏，泵血淋巴整个身体。 沿着后轮向头部移动，直到找到大脑。 淋巴腺是大脑旁边的一个小的多叶结构，侧翼的躯干血管。

要找到主叶，请识别腺体的最大叶。 此叶包含三个区域，由不同阶段的黄细胞发育定义。最接近母体容器的静修区包含不成熟的黄细胞，而皮质区包含成熟的黄细胞。 在主叶的后端，您可以找到由专门的六叶组成的后信号中心。二级和三级叶较小，没有定义区域。

要解剖淋巴腺，您需要解剖显微镜、两个钳子来操纵幼虫，以及缓冲盐水溶液。

在这个例子中，我们将解剖淋巴腺用于免疫造血。

-要开始淋巴腺解剖，在 24 井板的1口井中加入1 毫升 1x PBS，用于解剖每个实验设置。 然后，使用一次性转移移液器，为每口井添加 1 滴 0.1% 的 PBST。 将盘子平放在冰上。在照明立体显微镜底座上放置一个干净的解剖垫。使用一次性转移移液器将 0.01% PBST 的降幅放在垫子上。

将幼虫转移到PBST滴进行解剖。 用一对钳子将熔岩保持，向后侧向上，距离后端约 1/4 长度。 用第二对钳子，立即抓住前部的皮质层，轻轻地将幼虫切片拉向前部，直到嘴钩暴露。

释放皮质层并使用两个钳子将幼虫分开。 从PBST掉落中取出后端并丢弃。 固定在皮质层上以获得稳定性，然后使用第二对钳子抓住裸露的嘴钩并轻轻地将其拉出。 这将将皮质层从内部结构中分离出来。

保持口钩，小心地去除不需要的结构，如唾液腺、脂肪体和肠子。轻轻地拿起口钩的解剖组织复合物，并将其转移到冰上板块的一口井。尽可能多地重复解剖，但不要超过30分钟的解剖时间，然后再进入固定步骤。

要开始组织安装，请将一滴安装缓冲液放在玻璃滑梯上。使用口钩作为手柄，将淋巴腺转移到缓冲液滴中。均匀地将组织空间空间，在此过程中将安装缓冲区展开。

小心地将一钳钳滑到后轮下，轻轻地拉向安装缓冲器的外围，以拉出并平整淋巴腺。通过锯削运动，切开淋巴腺和大脑之间的躯干血管。将其余组织从淋巴腺移到缓冲的最外缘。

采取一个干净的盖滑，并小心地将其降低到安装缓冲器。 幻灯片现在已准备好成像，或可以存储在4摄氏度，直到需要。