Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

A subscription to JoVE is required to view this content.

דרוזופילה (לא כולל) ניתוח מוח למבוגרים

 
Click here for the English version

דרוזופילה (לא כולל) ניתוח מוח למבוגרים: שיטה בנוירוביולוגיה מעופפת

Article

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

- בצע את הניתוח בצלחת עם תמיסת חיץ ותחת תאורה אחידה. מעבירים זבוב, צד גחוני למעלה, לתוך המנה ושומרים על ההכנה שקועה לאורך כל ההליך.

כדי לבודד את המוח, להחזיק את הקצה המדיאלי של עין אחת לתפוס ולמשוך את proboscis בכיוון ההפוך כדי ליצור פתח לתוך קפסולת הראש. בעת החזקת הקוטיקולה בעין זו, לתפוס את הקצה המדיאלי של הקוטיקולה מהעין השנייה ולאט לאט למשוך את קפסולת הראש ישר כדי לחשוף את המוח. במידת הצורך, להמשיך לנקות שיורי קוטיקולה, שק אוויר מחובר, או קנה הנשימה. תכשירים באיכות גבוהה ישמרו מבנים כמו האונות האופטיות, המוח המרכזי, ו SOG. בפרוטוקול הדוגמה, נראה הדגמה מפורטת של Drosophila נהג לחקור את גופי הפטריות.

- כדי להגדיר את הניתוח, מניחים את זבובים מורדמים של עניין על כרית מתכת קרה או בצלחת פטרי יושב על קרח. לחילופין, להשתמש כרית זבוב הפולט פחמן דו חמצני. לאחר מכן, למקם כמות קטנה של PTN במרכז צלחת הניתוח כדי ליצור בועה של PTN. ואז, תחת סטריאומיקרוסקופ, למלא את שדה הראייה עם בועת PTN תחת תאורה אחידה. עכשיו, לתפעל זבובים, כך שהם בטן למעלה, ולהעביר אחד על ידי הבטן לתוך PTN. שקוע לחלוטין את החיה ב- PTN ולבצע את כל הנתיחה שקועה ב- PTN. זוג מלקחיים שני, לתפוס את proboscis ולמשוך את הראש מהגוף.

- Occassionally, proboscis יוסר אבל הראש יישאר מחובר לגוף. אם זה קורה, לתפוס את הקצה המדיאלי של רשתית אחת ולהפעיל כוח לרוחב כדי להסיר את הראש.

- להשליך את הבטן ואת בית החזה. זה קריטי כדי לשמור על הראש ב- PTN במהלך שלב זה. חיבורים מהמוח המרכזי ל- VNC בבירור לא ניתן לנתח בשיטה זו. הבא, לתפוס את הקצה המדיאלי של הרשתית השמאלית בקצה החור המרכזי בקוטיקולה, ולאט לאט למשוך את המלקחיים ישירות אחד מהשני כדי למנוע קריעת האונה האופטית, שהוא המבנה האטום מכוסה בקנה הנשימה לבן, חוטי.

- על מנת למנוע את קריעת המוח, חשוב מאוד לתפוס את הקצה המדיאלי של כל עין ולאט לאט למשוך את המלקחיים לגזרים.

- כפי שמוצג כאן, לתפוס את הקוטיקל עם כל זוג מלקחיים ולאט לאט למשוך אותם בכיוונים מנוגדים. הקוטיקל צריך להיפרד מרקמת המוח, משאיר את המוח שלם. מלקחיים חדים מאוד נדרשים לשלב זה. הבא, להסיר בזהירות את החלק הקצוץ שמסביב חתיכה אחר חתיכה. תוך הסרת קוטיקל מחובר בעקשנות, זה יכול לעזור לאבטח את המוח על ידי אחיזת VNC הנותרים, כדי למנוע ריסוק המוח.

Tags

ערך ריק הנפקה
Read Article

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter