Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- אפשר Drosophila להטיל ביצים לילה על צלחת המכילה אגר בתוספת מיץ ענבים כדי לדמיין ביצים מצופה שמרים כדי לעודד זבובים להזדווג ולהטיל ביצים. כדי להסיר את הביצים, מוסיפים מים מזוקקים לצלחת ומנגבים בעדינות את המשטח עם מברשת צבע.
הביצים דבוקות כעת לצד התותבים. שטפו אותן שלוש פעמים במים כדי להסיר את האקונומיקה. לבסוף, השתמשו במכחול כדי להעביר את הביצים מהתותבים לבקבוקונים כדי להמשיך בפיתוח או לשימוש מיידי בניסוי. בפרוטוקול לדוגמה, נאסוף ונוציא ביצי דרוסופילה בעשירון בתנאים סטריליים לגידול זבובים עם מיקרוביוטה מוגדרת.
- מניחים רשת ניילון לתוך תותב פלסטיק כדי להכין את המסננת לאיסוף ביצים. אם אותם זבובים ישמשו למחרת, העבירו אותם מיד לכלוב חדש המכיל צלחות אגר של מיץ ענבים טרי. צלחת מיץ הענבים בכלוב הקודם מכילה את ביצי זבוב הפירות.
לעקר את ארון biosafety עם 70% אתנול ואז להפעיל את אור UV. לרסס את כל האספקה הלא ביולוגית עם 70% אתנול ומיד למקם אותם בארון biosafety, ואז לעקר אותם עם אור UV.
- זה קריטי כדי להבטיח כי טכניקה אספטית טובה מתורגל בעת עבודה בתוך או בעת הוספה או הסרה של חומרים חדשים לארון biosafety.
- להעביר את התותבים עם הביצים לתוך כוס דגימה 120 מיליליטר ולאט לאט לשפוך 90 מיליליטר של 0.6% פתרון hypochlorite נתרן, או 7% אקונומיקה, לתוך התותבים, ממש מתחת לשפה. באמצעות מלקחיים, מעת לעת להזיז את תותבים למעלה ולמטה בתמיסה כדי resuspend את הביצים.
בסוף הטיפול השני באקונומיקה, הביצים צריכות להתחיל לדבוק בצידי התותבים.
באמצעות מברשת צבע סטרילית, להעביר את הביצים מצד התועבה לתרופה סטרילית.
