Отслеживание свободно ходить мух: метод для оценки передвижения в Drosophila

- Используйте покрытую арену - например, чашку Петри, наполненную четким силиконом - для обеспечения мухи могут свободно ходить, но не могут летать внутри арены, когда она покрыта. Поместите блюдо на белой освещенной поверхности и положение камеры прямо над.

С открытой крышкой, передача анестезированные мухи в блюдо, покрыть его, и позволяют субъектам восстановить. Мухи будут свободно перемещаться по арене во время судебного разбирательства. Для оценки передвижения, отслеживать положение каждой мухи с течением времени и рассчитать параметры, которые характеризуют передвижения, такие как расстояние, пройденное каждой мухой. В этом примере протокол, мы увидим демонстрацию анализа и анализа с помощью программного обеспечения видео слежения.

- Чтобы отследить движения мухи в чашке Петри, во-первых, заполните 6-сантиметровую тарелку прозрачным силиконовым еластомером, чтобы сделать трассу. Оставьте 3-миллиметровый зазор между силиконом и крышкой, чтобы мухи могли свободно ходить в зазоре, но не взлетать.

Далее, обезболить четыре мухи из одной и той же группы лечения и поместить их на арену. Пусть мухи акклиматизируются в течение часа на арену, которая должна быть полностью освещена и около 22 градусов по Цельсию, не жарче, чем комнатная температура. Через час, используйте зарядную камеру устройства, расположенную над ареной, чтобы зафиксировать активность мухи в течение 5 минут.

После 5-минутной записи, анестезировать мух на арене и вернуть их в новый домашний флакон. Затем, распоряжаться арене. Позже, анализировать записи с помощью свободно доступного программного обеспечения Ctrax. Это программное обеспечение генерирует данные отслеживания, которые могут быть экспортированы в программируемом языке совместимый формат, такой как формат MATLAB.

Из данных вычислите пройденное расстояние на кадр, среднее расстояние ходьбы для каждой мухи и среднее расстояние, пройденное за муху.