Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- En flyaspirator gjør det mulig for forskere å trygt overføre levende fluer uten fysisk skade eller bruk av anestesi, noe som kan påvirke eksperimentelle resultater.
For å montere aspiratoren trenger du plastrør, to 1 milliliter modifiserte pipettespisser, et nylonnett og en trimmet 200-mikroliterspiss. Lag et flyholdkammer i den ene enden av slangen med de større pipettespissene og masken. Nettet holdes på plass ved overlappingen av de to spissene.
Sett den mindre pipettespissen inn i den andre enden av slangen for å lage et munnstykke. For å fange en flue, hold den åpne enden av flykammeret nær fluen. Gi sug med munnen fra den andre enden av røret for å trekke flyet inn i aspiratoren. Nettet forhindrer at flyet beveger seg lenger ned i røret.
For å utvise den fangede fluen, juster kammeråpningen med målet, blås deretter forsiktig inn i røret, og gi nok kraft til å skyve flyet ut av kammeret. I dette eksemplet vil vi bruke en flyaspirator for å laste fluer inn i et pleiekammerapparat.
- For å starte eksperimentet, forbered en aspirator for å flytte levende Drosophila fra et kulturelt hetteglass til groomingkammeret. Bruk saks, kutt 1,5 fot tygonrør. Klipp minst 1 tomme av spissen av en 1 milliliter engangs mikropipettespiss og hold et 1 centimeter kvadratisk stykke nett over den 0,196-tommers åpningen av kuttspissen.
Plasser en frisk mikropipettespiss på 1 milliliter over nettet og klipp spissen for å lage et oppbevaringskammer for fluer. Klipp den ekstreme spissen av den nye mikropipettespissen for å utvide åpningen nok til at du kan passere en enkelt flue. Hullet vil omtrent matche åpningen av pleiekammeret.
Monter de nestede spissene godt på enden av Tygon-slangen. Skyv spissene inn i røret for å sikre en tett passform for å tillate vakuumtrykk. I den andre enden av slangen kutter du spissen av en mikropipettespiss på 200 milliliter og monterer den smale kuttenden i slangen for å danne munnsiden av aspiratoren.
