Encyclopedia of Experiments: Biology
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-首先,将一滴缓冲液移到干净的解剖垫上。然后,将干燥的活幼虫放在水滴上。与其他节肢动物一样,Drosophila有一个开放的循环系统,心脏在体内泵血淋巴,沐浴内脏。释放血淋巴,这是节肢动物的血液和间质液的组合,使用钳子,打开皮质层,幼虫的半刚性外层覆盖物。
然后,丢弃尸体,将血淋巴溶液从解剖板转移到微中心管中的冷却缓冲液中。 最后,使用血细胞计来计算收集的血细胞的数量,即血淋巴中的细胞。 在此协议中,我们将从德罗索菲拉黑色素加斯特幼虫中收集血淋巴。
- 开始血淋巴收集,将10微升的1倍PBS添加到微中心管中,并将管放在冰上。 接下来,将10微升的1倍PBS滴到干净的解剖垫上。 选择单个幼虫,将其放在组织擦拭上干燥。然后将其转移到解剖垫上的 PBS 液滴。
使用钳子,轻轻撕开并倒置基质层以释放血淋巴,然后丢弃尸体。 使用移液器,从解剖垫中收集血淋巴。将血淋巴加入冰的PBS 微中轴管中,然后通过上下管道混合。将样品中的 10 微升加载到血细胞仪室中,进行浓度读数。