Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Başlamak için, bir meyve sineği pupa dorsalını veya arkasını, yan tarafını sabitleyin. Hayvanın başını ortaya çıkarmak için pupanın operkülumunu veya ön ucunu çıkarın. Kovanı kesip soyup çıkararak pupayı açmaya devam edin. Serbest bırakıldıktan sonra, diseksiyonu önlemek için parçalanmış pupayı PBS ile örtün. Torakstan temiz, kesitsel bir kesim yapın ve karkasın arka kısmını çıkarın.
Optik loblara bağlı iki retinayı içeren göz-beyin kompleksini ortaya çıkarmak için, epiteli toraksın kesik-açık kenarından yırtmaya başlayın ve baş kapsülü yavaş yavaş açmaya devam edin.
Örnek protokolde, çeşitli aşağı akış analizleri için dokuyu izole etmek için kullanılan bir pupal göz-beyin diseksiyonunun bir gösterimini göreceğiz.
- Drosophila pupasını siyah bir diseksiyon kabına yerleştirdikten sonra, pupadan uzakta diseksiyon kabına taze bir parça çift taraflı bant yerleştirin ve pupa dorsal tarafını teybe dikkatlice yerleştirmek için bir çift toparlama kullanın.
Yemeği stereo mikroskop altına yerleştirin ve her pupanın operkülünden çıkarmak için önps kullanın. Her pupal kasayı dilimlemek için mikrodiseksiyon makası kullanın, başı, toraksı ve ön karın segmentini ortaya çıkarmak için açık çırpılmasını sağlayın ve pupal kasanın kenarlarını çift taraflı banta sabitleyin.
Her pupanın karnını keskin toparlamalarla delin ve pupayı pupal kasasından çıkarın. Pupayı diseksiyon kabına banttan uzağa yerleştirin ve pupayı 400 mikrolitre buz gibi PBS ile örtün. Her birini karnından kavramak için asaları kullanın ve torakstan temiz bir kesi yapmak için mikrodiseksiyon makasını kullanın, pupayı ikiye bölün.
İki çift ince önsezi kullanarak, her toraks epitelinin kesik kenarlarını kavrayın ve toraks ve kafa kapsülü yavaş yavaş yırtın, çevredeki yağ dokusundaki göz-beyin kompleksini açığa çıkarın.
