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Encyclopedia of Experiments: Biology

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선충의 동결 균열

 
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선충의 동결 균열 : 염색에 대한 내부 벌레 조직을 노출하는 방법

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- 이전에 폴리 리신으로 코팅 유리 슬라이드에 액체에 세척 C. e레건을 전송, 벌레 큐키클이 유리 표면에 달라붙는 데 도움이 되는 화합물. 아래쪽 슬라이드를 돌출한 가장자리로 다른 유리 슬라이드를 부드럽게 누르십시오.

금속은 블록 표면이 유리 표면에 웜의 큐틱스를 빠르게 얼려갈 만큼 차가워지도록 하는 효과적인 온도 도체입니다. 일단 동결되면, 유리 슬라이드를 신속하게 분리하여 벌레 큐티클을 분리하거나 균열. 낮은 투과성 큐티클의 중단으로 조직 고정 염색을 통해 화학 적 고착 염색 항체가 내부 조직에 접근할있게 합니다.

- 먼저, 벌레를 해결하기 위해 슬라이드를 준비합니다.  

다음으로, 액체 질소로 채워진 용기에 플랫 금속 블록을 배치. M9 용액으로 플레이트를 세척하고 벌레가 들어있는 M9의 10 마이크로 리터를 전송합니다.

웜이 옮겨지면 커버슬립 크로스웨이를 부드럽게 떨어뜨려 커버슬립이 한쪽 가장자리를 덮어놓습니다.

이제 슬라이드를 액체 질소의 금속 블록으로 즉시 옮기고 얼게 됩니다. 5분 돌출 가장자리를 사용하여 커버 슬립을 튕깁니다.

다음으로, 메탄올이채워진 유리 코플린 항아리에 미끄러져 영하 20도에서 미끄러지면 5분 후에 같은 온도에서 5분 동안 아세톤이채워진 유리 코플린 항아리로 슬라이드를 옮기십시오.

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빈 값 문제
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