Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- İlk olarak, bantlı diğer iki slayt arasına bir mikroskop slayt yerleştirin. Bunlar agarose ped hazırlığı için destek ve aralayıcılar sağlar. Sonra, kaydırağın üzerine bir damla erimiş agarose yerleştirin. Hemen başka bir slaytla üzerine bastırın.
Agarose katılaştıktan sonra, slaytları dikkatlice ayırın, böylece agarose bir slaytta kalır. Kurumuş pedler hayvanları susuzlaştırabileceğinden her zaman taze yapılmış pedler kullanın. Ped bütünlüğünü bozabilecek çatlak veya kabarcık olmadığından emin olun.
Daha sonra, ped merkezine bir damla anestezi ekleyin ve 10 ila 15 hayvanı aktarın, mümkün olduğunca az bakteri getirin. Aşırı bakteriler görüntülemeye engel olabilir. Anestezik çözelti kurursa, hayvanlara ikinci bir damla ekleyin.
Pedi hafifçe örtün. Kabarcıklar oluşturmaktan veya hayvanlara zarar vermemek için üzerine çok fazla baskı yapmaktan kaçının. Son olarak, görüntülemeye hazır olan slaydı etiketleyin.
- Görüntüleme için slaytlar hazırlayarak başlayın. Bir mikroskop kaydırağı üzerine bir damla eritilmiş agarose yerleştirin ve hemen başka bir mikroskop slaytı ile damlacığı bastırın agarose hafifçe düzleştirin Agarose'un bir dakika kurumasına ihtiyacınız vardır.
Ardından, iki slaydı dikkatlice ayırın ve katılaşmış pedi slaytlardan birinde bırakın. Slaydı mikroskop aşamasına yerleştirin ve agras pad'in ortasına 5 ila 10 mikroliterlik bir anestezi damlası ekleyin.
Çözelti kurumadan önce 10 ila 15 hayvanı stok plakasından anestezik damlacığa hızlı bir şekilde aktarmak için ısı sterilize edilmiş bir çekme kullanın.
