游泳诱发性麻痹（SWIP）分析：量化C.elegans多巴胺介导运动的方法

-为了执行游泳诱发的麻痹，或SWIP检测，将L4分阶段的C.elegans幼虫转移到装满液体的玻璃斑板上。 通过正在发育的外阴的存在识别L4草药。身体中点的半月形斑块，以及鞭状的尾巴。

为了评估多巴胺介质的游泳，记录蠕虫以C形身体弯曲和猛击行为为特征的运动。通常，多巴胺神经元将多巴胺释放到突触裂口中，而突触裂口又将多巴胺受体结合在接收细胞上。

消息传递后，多巴胺从受体中释放出来，未受约束的神经递质可以通过专门的运输蛋白被多巴胺神经元占用并重复使用。

在多巴胺信号改变的幼虫中，由于多巴胺运输机的灭活突变或增加多巴胺释放的药物治疗，多巴胺会积聚在突触裂口中。过量多巴胺会刺激多巴胺受体干扰运动程序，使幼虫瘫痪。无法移动的幼虫会沉入板块底部。

在示例协议中，我们将看到使用安非他明处理的 C. elegans 中手动和自动 SWIP 检测的详细演示。

- 为了手动评估SWIP，在玻璃点板中加入40微升控制溶液，或不含0.5毫摩尔安非他明。 在立体镜下，用睫毛采摘8至10个后期L4级蠕虫，将精选物浸入含有溶液的井中，直到蠕虫离开采摘并游入溶液中。

启动计时器。注意释放到井中的蠕虫数量，观察并记录每分钟标记显示 SWIP 的蠕虫数量，共 10 分钟。

在程序结束时，将原始数据复制到电子表格中，通过将每分钟瘫痪的蠕虫数量除以在整个检测过程中测试的蠕虫总数和乘以 100的蠕虫数量来计算瘫痪蠕虫的百分比。 将百分比值复制到任何图形和统计软件中，并使用 xy 图形格式在y 轴上绘制 SWIP 百分比值和 X 轴上的时间百分比数据。

可对对照组和安非他明治疗组以及治疗时间进行统计分析，例如，采用ANOVA和事后分析两种方式。

为了自动分析游泳引起的瘫痪，设置摄像头、蠕虫跟踪软件和脚本来运行跟踪软件分析，并使用睫毛拾取将单个后期 L4 蠕虫放入玻璃斑板中，如前所示。

然后，记录一次一个蠕虫的游泳视频，并使用蠕虫跟踪软件计算身体弯曲的频率。