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Drosophila ( Drosophila ) Aggression Assay

 
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Drosophila ( Drosophila ) Aggression Assay: Une méthode pour tester la plasticité comportementale chez les mouches

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- Pour évaluer l’agressivité chez les mouches, utilisez une chambre de combat fermée équipée de deux points d’entrée et d’un séparateur pour séparer les sujets avant le procès. Placez une source de nourriture au centre de la chambre pour créer un conflit pour les mouches. Ensuite, chargez les mâles précédemment isolés et marqués à travers les points d’entrée de chaque côté de l’arène. Retirez le séparateur et enregistrez les rencontres des mouches pour quantifier l’agression.

Pour établir la domination, un mâle affiche des comportements offensifs stéréotypés qui augmentent en intensité, de l’approche et la poursuite de l’adversaire à se jeter, un comportement qui indique l’agression, la mouche attaquante soulève haut sur ses pattes arrière et s’enclenche sur l’adversaire dans une tentative de l’attraper. En revanche, l’adversaire affiche des comportements défensifs, comme s’enfuir en retraite de l’attaquant. Ainsi, un perdant et un gagnant émergent de la lutte, et un souvenir de défaite ou de victoire se forme dans chaque adversaire.

Dans le protocole d’exemple, nous verrons comment une configuration qui élimine la manipulation des animaux pendant l’analyse d’agression est utilisée pour étudier la formation de la mémoire chez les mouches qui ont perdu leur premier combat, appelé effet « perdant ».

- Commencer des expériences comportementales en insérant des séparateurs en plastique dans chaque chambre de combat. Retirer le bouchon de coton du tube d’isolement et positionner le tube sous un trou ouvert sur le côté de l’appareil. Permettre à la mouche d’entrer dans la chambre de combat par des géotaxis négatifs. Puis, fermez le mur coulissant après l’entrée de la mouche dans la chambre. Répétez la procédure d’introduction de la deuxième mouche dans la chambre de combat de l’autre côté de l’appareil.

Ensuite, replacez l’appareil dans la position d’enregistrement vidéo illuminée. Commencez l’enregistrement vidéo et retirez le séparateur en plastique pour permettre aux mouches d’interagir. Pour les expériences d’effet « perdant », enregistrez les premiers combats pendant 20 minutes pour assurer la formation de fortes relations de dominance. Après 20 minutes, remplacez doucement le séparateur en plastique dans les chambres de combat pour séparer les mouches et arrêter la vidéo.

- Pour induire une forte mentalité de « perdant », assurez-vous que les mouches établissent et maintiennent une relation de dominance pendant les premiers combats, puis minimisez les perturbations des animaux lors de l’insertion des séparateurs pour séparer les mouches.

- Après une période de repos de 10 minutes, commencer l’enregistrement et retirer délicatement le séparateur en plastique. Laissez les mouches interagir pendant 20 minutes supplémentaires. Arrêtez d’enregistrer après 20 minutes. Pour conclure l’expérience, retirez les mouches des chambres comportementales par des géotaxis négatifs en inversant la procédure décrite précédemment.

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