Drosofilia Saggio di aggressione: un metodo per testare la plasticità comportamentale nelle mosche

- Per valutare l'aggressività nelle mosche, utilizzare una camera di combattimento chiusa dotata di due punti di ingresso e un divisore per tenere separati i soggetti prima del processo. Posizionare una fonte di cibo al centro della camera per creare conflitti per le mosche. Quindi, caricare maschi precedentemente isolati e contrassegnati attraverso i punti di ingresso su entrambi i lati dell'arena. Rimuovere il divisore e registrare gli incontri delle mosche per quantificare l'aggressività.

Per stabilire il dominio, un maschio mostra comportamenti offensivi stereotipatici che aumentano di intensità, dall'avvicinarsi e inseguire l'avversario all'affondo, un comportamento che indica aggressività, in cui la mosca attaccante si alza in alto sulle zampe posteriori e si aggancia all'avversario nel tentativo di afferrarlo. Al contrario, l'avversario mostra comportamenti difensivi, come scappare in ritirata dell'attaccante. Così, un perdente e un vincitore emergono dal combattimento, e un ricordo di sconfitta o vittoria si forma in ogni avversario.

Nel protocollo di esempio, vedremo come una configurazione che elimina la manipolazione degli animali durante il test di aggressione viene utilizzata per studiare la formazione della memoria nelle mosche che hanno perso il loro primo combattimento, definito effetto "perdente".

- Iniziare gli esperimenti comportamentali inserendo divisori di plastica in ogni camera di combattimento. Rimuovere il tappo di cotone dal tubo di isolamento e posizionare il tubo sotto un foro aperto sul lato dell'apparecchio. Consentire alla mosca di entrare nella camera di combattimento con geotassi negativi. Quindi, chiudere la parete scorrevole dopo che la mosca è entrata nella camera. Ripetere la procedura per introdurre la seconda mosca nella camera di combattimento dall'altra parte dell'apparecchio.

Quindi, riposizionare l'apparecchio nella posizione di videoregistrazione illuminata. Iniziare la registrazione video e rimuovere il divisore di plastica per consentire alle mosche di interagire. Per gli esperimenti di effetto "perdente", registrare i primi combattimenti per 20 minuti per garantire la formazione di forti relazioni di dominanza. Dopo 20 minuti, sostituire delicatamente il divisore di plastica nelle camere di combattimento per separare le mosche e fermare il video.

- Per indurre una forte mentalità da "perdente", assicurati che le mosche stabiliscano e mantengano una relazione di dominio durante i primi combattimenti, quindi riduci al minimo il disturbo degli animali quando inseriscono i divisori per separare le mosche.

- Dopo un periodo di riposo di 10 minuti, iniziare a registrare e rimuovere delicatamente il divisore di plastica. Lasciare le mosche per interagire per altri 20 minuti. Interrompere la registrazione dopo 20 minuti. Per concludere l'esperimento, rimuovere le mosche dalle camere comportamentali con geotassi negativi invertendo la procedura descritta in precedenza.