Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- ابدأ باختيار يرقة نجمة ثالثة، أكبر أشكال اليرقات، من الوسط الثقافي، وغسلها بالماء لإزالة أي طعام. وبما أن عيون اليرقات، أو أعضاء بولفيغ، تقع في الجزء العلوي من اليرقة، ضع اليرقة في وسط صفيحة أجار مع مصدر الضوء فوق الحيوان.
وبما أن اليرقة بالكاد يمكن اكتشافها في بقعة ضوئية مصنوعة من الضوء المرئي، قم بتشغيل أضواء LED بالأشعة تحت الحمراء لإلقاء الضوء على الحيوان للكاميرا. انتظر حتى يبدأ الحيوان في الزحف مباشرة للتحكم في مساره. ثم قم بتدوير اللوحة بحيث تزحف اليرقة مباشرة نحو بقعة الضوء. سجل الحيوان الزاحف إلى الضوء ثم بعيدا عن بقعة الضوء.
في المثال التالي ، سنقوم بإجراء فحص بقعة الضوء لاختبار قدرة السلالات الوراثية المختلفة ليرقات Drosophila على الهروب من الضوء.
- قبل إدخال اليرقة إلى إعداد التصوير، احصل على فيديو قصير لوضع الضوء، واسم فيديو خلفية التحكم غير المصفاة "lightarea1". ضع الفلتر مرة أخرى على عدسة الكاميرا، ثم قم بتشغيل ضوء بعيد عن الجهاز التجريبي عند أدنى إعداد ممكن مع السماح مع الاستمرار في ملاحظة اليرقات بوضوح. استخدم ملعقة لإزالة بعض اليرقات من وسيط الثقافة، وحدد بلطف يرقة نجمية ثالثة.
اغسل اليرقة في الماء المقطر، وضع اليرقة في وسط صفيحة أجار. أزل بلطف أي مياه زائدة من اليرقة، وأطفئ ضوء الغرفة.
فرشاة اليرقة برفق إلى وسط اللوحة. عندما تبدأ اليرقة في الزحف مباشرة ، قم بتدوير اللوحة لجعل رأس اليرقة نحو بقعة الضوء. انقر فوق التقاط والإعداد والتقاط الفيديو لتحديد مسار الحفظ. وانقر فوق بدء التسجيل للتسجيل.
حرك الفلتر بعيدا عن الكاميرا، والحصول على فيديو قصير عن موضع البقعة الضوئية. ثم قم بتسمية المنشور كفيديو غير مفلتر، "lightarea2"، وقارن هذا الفيديو بالفيديو "lightarea1" لضمان عدم تغيير موضع بقعة الضوء.
