Encyclopedia of Experiments: Biology
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- Para probar la preferencia de temperatura de las larvas de Drosophila, crear un gradiente de temperatura calentando un lado de una placa de ensayo de aluminio y enfriando el otro.
Cubra todo el sistema para eliminar la interferencia de la luz brillante e iniciar el ensayo.
En el protocolo de ejemplo, veremos cómo configurar un gradiente de temperatura de una sola dirección entre 18 y 28 grados Centígrados, y cómo se manejan las larvas durante el ensayo.
- Para preparar un gradiente monodireccional, primero, Crear un ambiente húmedo para el ensayo. Coloque dos bloques de aluminio conectados a baños de agua separados en toallas de papel mojado a 10 centímetros de distancia. Los baños de agua deben calentarse con anticipación.
Luego, para promover una transferencia de temperatura eficiente, llene cualquier hueco entre los bloques de aluminio en las placas de ensayo con agua entregada desde una botella de pulverización.
A continuación, rocíe una película de agua sobre la superficie de las placas para que los geles no se sequen. A continuación, cubra el sistema con una caja de cartón para reducir la evaporación y ayudar a estabilizar la temperatura de la superficie del gel. Espere de 5 a 10 minutos para permitir que la temperatura se equilibre.
Primero, retire la caja de cartón sobre el gel y compruebe rápidamente la temperatura de la superficie del gel. Si la superficie está seca, rocíe una pequeña cantidad de agua en la superficie.
Después de 10 a 30 minutos, retire la caja de cartón y la tapa de la microplaca.
Ahora, calcule el porcentaje de distribución de larvas en cada zona utilizando software de análisis de imágenes.
- Al contar, ignora las larvas distribuidas en regiones a 0,5 centímetros de cada borde.
