ショウジョウバエ 光遺伝学:神経回路を操作する方法

-ショウジョウニアハエでは、捕食者のアプローチを知らせる迫り来る視覚刺激が脱出応答を引き起こす神経回路を活性化します。

チャネロドプシンは、明るい青色光にさらされると開く光感受性カチオンチャネルです。その後のナトリウムイオンの流入は、ニューロンが回路に沿って情報を発射して中継する作用電位を急上昇させます。

したがって、フライフードに全トランスレチナルを提供し、通常は非常に少量で存在するので、さらに、視覚刺激への応答に関与する神経回路におけるニューロンの役割を調査する際に、他の光応答を防ぐために視覚盲目であるハエを使用する。

最後に、青色のLEDライトを使用して、迫り来る刺激によって引き起こされるのと同じ行動を引き起こします。例のプロトコルでは、光学ローブニューロンでチャネロドプシンを発現するハエの食物調製と光誘発行動応答が見られます。

- 標準的なコーンミールフライフードを電子レンジで溶かし、暖かくなるまで冷まします。冷めたら、以前に準備した20ミリモルオールトランスレチナルの50マイクロリットルを各バイアルに混ぜます。

まず、氷の上のハエを短時間麻酔します。その後、チップカットでP1000ピペットチップに個々のハエを置き、約2.25ミリメートルの細孔直径を形成し、両端をテープで密封します。

ハエは通常、30秒から60秒の間先端を探索します。ハエが先端の上部に近づくと、ハエがプラットフォームに現れる直前にカメラ録画を開始します。