Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- I Drosophilia flugor aktiverar en hotande visuell stimulans som signalerar tillvägagångssättet hos en rovdjur neuronala kretsar som utlöser ett flyktsvar.
Channelrhodopsin är en fotokänslig katjonkanal som öppnas när den utsätts för ljusblått ljus.
Ge därför all-trans-retinal i flugmaten, eftersom den vanligtvis finns i mycket små mängder. Dessutom, när du undersöker neuronernas roll i en neural krets som är involverad i ett svar på en visuell stimulans, använd flugor som är visuellt blinda för att förhindra andra ljussvar.
Slutligen, använd ett blått LED-ljus för att utlösa samma beteende som orsakas av den hotande stimulansen.
- Börja med att smälta standard majsmjöl flyga mat i en mikrovågsugn, och låt det svalna tills det är varmt att röra vid. När det är kylt, blanda 50 mikroliter tidigare beredda 20-millimolar all-trans-retinal i varje flaska. Sedan låt injektionsflaskan svalna och håll skyddad mot ljus tills det behövs.
Först bedöva flugorna på is. Placera sedan enskilda flugor i P1000-pipettspetsar med spetsskärningen för att bilda en pordiameter på cirka 2,25 millimeter och försegla varje ände med tejp. När flugan har vaknat och utforskar pipettspetsen, ta bort tejpen och placera snabbt spetsen i spåret i den vertikala hållaren.
Flugor utforskar vanligtvis spetsen i mellan 30 och 60 sekunder.
