Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- C. elegans تحدث في جنسين: hermaphrodites، التي لديها اثنين من الكروموسومات X، والذكور، والتي لديها كروموسوم X واحد فقط يشار إليها باسم XO أو X فارغة.
تنتج Hermaphrodites كل من البويضات والحيوانات المنوية ويمكن أن تتكاثر عن طريق الإخصاب الذاتي.
نادرا ما يتم فقدان كروموسوم X أثناء تكوين الألعاب ، مما يؤدي إلى ذرية ذكورية فقط حوالي 0.1 إلى 0.2٪ من الوقت.
بدلا من ذلك، يمكننا أن نجعل hermaphrodite مع ذكر مما أدى إلى حوالي نصف النسل يجري الذكور. عند تنفيذ هذا الصليب الوراثي، تأكد من أن تشمل الذكور أكثر من hermaphrodites لضمان كفاءة التزاوج.
- أولا، الحصول على عدد كبير من الذكور عن طريق عبور خمسة ذكور البرية وواحد hermaphrodite على حديقة صغيرة من البكتيريا OP50 القولونية المصنفة في وسط متوسط نمو النيماتودا أو لوحة NGM. ما يقرب من 50٪ من الجيل القادم سيكون الذكور البرية.
لجمع الذكور المرحلة L4، ودراسة مرحلة النمو ومورفولوجيا الذيل تحت المجهر تشريح. يتم اختيار دودة المرحلة L4 على أساس مورفولوجيا الذيل.
باستخدام سلك البلاتين، واختيار 7 إلى 10 الذكور المرحلة L4 لكل تجربة ونقلها إلى لوحة NGM المبذر مع OP50 والسماح لهم بالنمو لمدة يوم أو يومين.
