Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Medir la vida media de una población de nematodos, comenzar con larvas L1 sincronizadas por desarrollo en amortiguador M9. Determinar la densidad de las larvas, luego añadir 50 a cada placa.
Permita que estos gusanos se desarrollen normalmente hasta que lleguen a la etapa L4. Ahora puede agregar FUdR a las placas, lo que evitará que los gusanos produzcan progenie.
A continuación, eliminar cualquier macho. Esto eliminará las variables del sexo y el apareamiento del experimento. Al día siguiente, contar el número de gusanos vivos en la placa buscando movimiento espontáneo o respuesta al tacto suave. Retire los gusanos muertos y registre los números.
- Cargar las placas preparadas de semillas de bacterias con 50 L1 animales cada uno. Instalar las placas en una incubadora de 20 grados Celsius hasta que los embriones se desarrollen a la etapa L4.
Luego, para evitar la producción de progenie, agregue 160 microlitros de 50x FUdR a cada placa.
Hasta que todos los gusanos estén muertos, puntúe su viabilidad a diario. Para ello, toque suavemente cada nematodo no móvil en la cabeza con un alambre de platino o pestaña.
