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JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

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अंडा बिछाने परख

 
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अंडा बिछाने परख: एक विधि सी elegans के अंडे बिछाने व्यवहार की मात्रा निर्धारित करने के लिए

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- अंडे बिछाने की मात्रा निर्धारित करने के प्रयोगों से न्यूरोलॉजिकल घटकों और पर्यावरणीय संकेतों का पता चला है जो इस व्यवहार को प्रभावित करते हैं। अंडे बिछाने के व्यवहार में परिवर्तन न्यूरोमस्कुलर या प्रजनन प्रणालियों पर विषाक्त प्रभाव का संकेत दे सकते हैं।

विषाक्तता के लिए परीक्षण करने के लिए, नेमाटोड विकास मीडिया प्लेटों पर विकास-सिंक्रोनाइज्ड अंडे को ब्याज के यौगिक के साथ और बिना बढ़ाएंये प्रयोग गर्मी से मारे गए बैक्टीरियल कृमि भोजन का उपयोग करते हैं ताकि बैक्टीरिया को यौगिक चयापचय से रोका जा सके इस पीढ़ी को तब तक बढ़ने दें जब तक कि वे युवा वयस्क न हो जाएं

फिर उचित नियंत्रण या प्रयोगात्मक परिस्थितियों में नई प्लेटों पर कीड़े ले जाएं, और उन्हें 24 घंटे के लिए अंडे डालने के लिए छोड़ दें प्रत्येक दिन वयस्कों को एक नई थाली में स्थानांतरित करें, और पिछली प्लेट पर अंडे गिनेंजब तक वयस्क बिछाना बंद कर देते हैं, जंगली प्रकार के कीड़े के लिए लगभग पांच दिन प्रत्येक दिन प्रति वयस्क कीड़े रखे अंडे की संख्या की गणना करें, और प्रयोग के अंत में कुल जोड़ें

उदाहरण प्रोटोकॉल में, हम प्रजनन विषाक्तता के लिए ईटोपोसाइड--एक कीमोथेरेपी दवा का परीक्षण करने के लिए सी एलिगेंस अंडे बिछाने परख का उपयोग करेंगे।

- युवा वयस्क चरण तक 64 घंटे के लिए 20 डिग्री सेल्सियस पर डीएमएसओ या एटोपोसाइड युक्त एनजीएम प्लेट पर उम्र-सिंक्रोनाइज्ड अंडे को इनक्यूबेट करें। 24 घंटे तक पांच वयस्क कीड़े को नई एनजीएम प्लेटों में केमिकल या नई एनजीएम प्लेटों के बिना स्थानांतरित करें, जिसमें एक ही रासायनिक पूर्व उपचार होता है, और उन्हें 24 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया जाता है।

वयस्कों को नई एनजीएम प्लेटों में स्थानांतरित करें, जैसा कि अभी प्रदर्शित किया गया है, और हर दिन अंडों की संख्या की गणना करें । इसके अलावा, कीड़े है कि बंद रेंगते, मर गया, या आंतरिक रूप से रची गई गिनती पाठ प्रोटोकॉल के अनुसार गणना करें

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