Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Эксперименты по количественной оценке откладывая яйцеклеток выявили неврологические компоненты и экологические сигналы, которые влияют на такое поведение. Изменения в поведении яйцекладки могут указывать на токсическое воздействие на нервно-мышечную или репродуктивную системы.
Чтобы проверить токсичность, поднимите разработать синхронизированные яйца на пластинах нематод роста средств массовой информации с и без соединения интереса. Эти эксперименты используют тепло-убитой бактериальной пищи червя, чтобы предотвратить бактерии от метаболизма соединения.
Затем переместите червей на новые пластины при соответствующем контроле или экспериментальных условиях, и оставьте их откладывать яйца в течение 24 часов. Каждый день, перенесите взрослых на новую тарелку, и подсчитайте яйца на предыдущей тарелке. Продолжайте, пока взрослые не перестанут откладывать, около пяти дней для червей дикого типа. Рассчитайте количество яиц, отложенных на взрослого червя каждый день, и сложите итог в конце эксперимента.
В примере протокола, мы будем использовать C. elegans яйцекладка анализ для тестирования этопозида - химиотерапевтических препаратов - для репродуктивной токсичности.
- Инкубировать возраст синхронизированные яйца на пластине NGM, содержащей DMSO или этопозид при 20 градусах по Цельсию в течение 64 часов, до стадии молодого взрослого. Перенесите пять взрослых червей на новые пластины NGM без химических веществ или новые пластины NGM, содержащие ту же химическую предварительную обработку, и инкубировать их в течение 24 часов.
Перенесите взрослых на новые ngM пластины, как только что продемонстрировано, и подсчитайте количество яиц каждый день.Кроме того, подсчитайте червей, которые отползли, умерли или были внутренне вылуплены.
