Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- C. elegans bevæger sig på sin side ved at generere sinusformede bølger langs sin krop. Dyret bevæger sig i en fremadrettet retning, når bølgerne formeres fra hovedet til halen.
Baglæns bevægelse, kendt som tilbageførsler, er kort og enten opstår spontant eller udløses af en sensorisk stimulus, for eksempel en blid berøring til ormens forreste.
Brug et steriliseret fint hår, udfør en blid berøring til den forreste del af kroppen. Dette vil fremkalde en flugtrespons, hvor ormen udfører en vending. Tillad et 10-sekunders interstimulusinterval for ormen at komme sig og gentage berøringen. For at vurdere tilvænning, som er en form for ikke-associativ læring, skal du registrere antallet af berøringer, indtil en vending ikke længere overholdes.
I eksemplet protokol, vil vi se en demonstration af den forreste touch habituation assay.
- For det første brug af brand steriled 30-gauge platin wire pick at overføre ca 10 synkroniserede unge voksne orme til nye unseeded NGM plader. Lad ormene uforstyrret i fem minutter for at give dem tid til at akklimatisere sig til den nye plade. Derefter sterilisere et øjenbryn hår fastgjort til slutningen af et træ spyd eller tandstikker ved at dyppe i 70% ethanol.
Tør med et rent, fnugfrit væv og vent et minut på, at ethanolen fordamper. Rør forsigtigt ved ormen på hovedet ved hjælp af øjenbrynshåret. Gentag berøringerne, så der er 10 sekunder mellem berøringerne, så ormen kan komme sig.
Fortsæt med at røre ved tillader 10-sekunders interstimulus intervaller, indtil ormen ikke længere bevæger sig baglæns.
- Det er vigtigt at tillade et 10-sekunders interval mellem berøringer, da dette giver dyret restitutionstid og hjælper med at opnå konsekvente tilvænningsadfærdsanalyser.
