Encyclopedia of Experiments: Biology
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- C. elegans se déplace sur le côté en générant des ondes sinusoïdales le long de son corps. L’animal se déplace dans une direction vers l’avant lorsque les ondes se propagent de la tête à la queue. Inversement, lorsque les ondes sinusoïdes se propagent de la queue à la tête, le ver se déplace vers l’arrière.
La locomotion vers l’arrière, connue sous le nom d’inversions, est brève et se produit spontanément ou est déclenchée par un stimulus sensoriel, par exemple, une légère touche à l’antérieur du ver. Pour effectuer l’analyse antérieure d’accoutumance au toucher, isoler les vers précédemment synchronisés du stade de développement désiré sur les plaques de MNM non ensemencées.
À l’aide d’un cheveu fin stérilisé, effectuez une légère touche à la partie antérieure du corps. Cela suscitera une réaction d’évasion lorsque le ver effectue un renversement. Autoriser un intervalle interstimulus de 10 secondes pour que le ver récupère et répète le toucher. Pour évaluer l’accoutumance, qui est une forme d’apprentissage non associatif, enregistrez le nombre de touches jusqu’à ce qu’un renversement ne soit plus observé.
Dans le protocole d’exemple, nous verrons une démonstration de l’analyse antérieure d’accoutumation tactile.
- Tout d’abord, l’utilisation d’une pioche métallique en platine de calibre 30 stérilisée pour transférer environ 10 vers synchronisés jeunes adultes vers de nouvelles plaques de NGM non enseilées. Laissez les vers intacts pendant cinq minutes pour leur laisser le temps de s’acclimater à la nouvelle plaque. Ensuite, stérilisez les poils des sourcils attachés à l’extrémité d’une brochette en bois ou d’un cure-dent en trempant dans 70 % d’éthanol.
Essuyez avec un tissu propre et sans peluche et attendez une minute que l’éthanol s’évapore. Touchez doucement le ver sur la tête à l’aide des poils des sourcils. Répétez les touches en laissant 10 secondes entre les touches pour permettre au ver de récupérer.
Continuer à toucher permettant des intervalles interstimulus de 10 secondes jusqu’à ce que le ver ne se déplace plus vers l’arrière. Enregistrez le nombre de touches nécessaires à cette accoutumance.
- Permettre un intervalle de 10 secondes entre les touches est important, car cela permet au temps de récupération de l’animal et aide a été d’obtenir des tests de comportement d’accoutumabilité cohérente.
