전기 탁사 분석 : C. 예인선에서 운동을 관찰하는 방법

- 감각 자극이 없으면 C. 엘레간 운동은 일반적으로 전방으로 진행되며 반전과 회전에 의해 중단됩니다. C. elegans는 전기장을 감지할 수 있습니다.

웜의 움직임을 보다 정확하게 관찰하려면 동물을 미세 유체 장치에 배치하고 DC 전기장을 적용합니다. 필드의 방향을 뒤집고, 벌레는 음극의 방향을 향해 반대 방향으로 돌립니다.

다음 예제 프로토콜에서는 미세 유체 장치에서 전기 탁세 분석법을 보여주는 설정을 볼 수 있습니다.

- 방금 조립된 마이크로 채널을 모니터에 연결된 장착 된 카메라로 현미경의 xy-이동 단계에 배치하여이 단계를 시작합니다.

마이크로 채널의 저항이 약 0.6 메가 옴임을 확인한 후, 마이크로 채널의 출력 튜브를 일회용 주사기에 부착한 다음 입구 튜브의 입을 M9 생리적 완충제에 매달린 선충의 용액으로 담급한다.

입구와 콘센트 튜브가 모두 채워지면, 주사기를 분리하고 튜브의 상대 높이를 조정하여 흐름을 분리하여 채널을 중앙에 배치합니다.

- 흐름이 실제로 0인지 확실하지 않다면, 전기장의 극성을 변경하고 벌레의 선형 속도를 평가하여 벌레의 움직임에 반전을 유도할 수 있습니다.

- 이제 전원 공급 장치를 적절한 전압으로 설정합니다. 전기 신호를 활성화하고 웜이 필드에 적응하기 위해 1 분 사전 노출을 허용하며, 그 동안 웜은 음극을 향해 움직이기 시작해야합니다.

실험이 완료되면, 수로에서 모든 액체와 벌레를 제거. 이온화 된 물로 챔버를 헹구고 건조섭 125도에서 뜨거운 접시에 장치를 둡니다.