Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- بدون المحفزات الحسية ، تكون حركة C. elegans إلى الأمام بشكل عام وتنقطع بسبب الانتكاسات والمنعطفات - مناورات إعادة التوجيه العشوائية التي تؤدي إلى تغيير الاتجاه.
لمراقبة حركة الدودة بشكل أكثر دقة ، ضع الحيوان في جهاز ميكروفلويديك وتطبيق حقل كهربائي DC. عكس اتجاه الحقل، والدودة سوف تتحول في الاتجاه المعاكس - نحو اتجاه الكاثود. تطبيق تيار بالتناوب، AC، والدودة سوف تتوقف. التغيير بالتناوب في اتجاه الحقل تطغى على النظم العصبية الحركية للدودة، مما أدى إلى شل الدودة.
في بروتوكول المثال التالي، سوف نرى الإعداد مما يدل على المقايسة electrotaxis في جهاز microfluidic.
- ابدأ هذه الخطوة بوضع القناة الصغيرة التي تم تجميعها للتو على مرحلة xy- المنقولة من المجهر مع كاميرا محمولة متصلة بشاشة.
بعد التأكد من أن مقاومة القناة الدقيقة تبلغ حوالي 0.6 ميجا أوم، قم بتوصيل أنبوب إخراج القناة الدقيقة بحقنة يمكن التخلص منها.
عندما يتم تعبئة أنبوبي المدخل والمنفذ على حد سواء ، افصل الحقنة وتلاعب hydro-statically بالتدفق عن طريق ضبط الارتفاع النسبي للأنبوب لوضع دودة في وسط القناة.
- إذا كنا غير متأكدين من أي وقت مضى ما إذا كان التدفق هو صفر حقا، يمكننا أن نحفز على عكس في حركة الدودة عن طريق تغيير قطبية المجال الكهربائي ومن ثم تقييم السرعة الخطية للدودة لأنها تتحول.
- الآن، تعيين إمدادات الطاقة إلى الجهد المناسب. تنشيط الإشارة الكهربائية، والسماح دقيقة واحدة من التعرض المسبق للدودة للتأقلم مع الحقل، وخلال هذه الفترة يجب أن تبدأ الدودة تتحرك نحو الكاثود.
عند الانتهاء من التجربة، قم بإزالة جميع السائل والديدان من القناة.
