Encyclopedia of Experiments: Biology
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- C. elegans는 질병을 일으키는 장 병원체에 의한 감염실험 모델로 사용되며, 부분적으로장 장벽을 방해하여 투과성을 증가시고 있습니다.
다음으로, 이 벌레를 불등 태그가 달린 고분자 분자량 다당류인 FITC-dextran과 혼합한 열사형 대장균으로 구성된 라벨이 붙은 식품으로 한천 접시에 놓습니다.
벌레가 표기된 박테리아를 먹도록 허용하십시오. 온전히 장 내 장벽이있는 사람들은 음식을 빠르게 지울 것이며, 더 투과성 장이있는 벌레에서는 형광 마커가 장기의 루멘 너머로 침투합니다.
벌레를 포름알데히드 용액으로 이송하여 동물을 고치게 합니다. 1-2분 후에 포름알데히드를 장착 매체로 교체하십시오.
마지막으로, 형광 현미경 검사법에 의한 웜을 이미지합니다.
실시예 프로토콜에서, 우리는 병원성 슈도모나스 아에루기노사 박테리아에 감염된 벌레의 장 투과성에 대한 생체 분자 DIM을 가진 치료의 효과를 분석할 것입니다.
- 2 밀리리터의 열 비활성화 E를 혼합하여 FITC-dextran 보충 플레이트를 준비합니다. 4 밀리그램의 FITC-dextran을 곁들인 대장균. 20개의 신선한 NGM 한천 접시에 혼합물 100마이크로리터를 추가하고 깨끗한 실험실 벤치에서 1시간 동안 플레이트가 건조할 수 있도록 허용합니다.
다음 날, S 버퍼로 벌레를 씻고 신선한 NGM 한천 접시에서 1 시간 동안 크롤링 할 수 있습니다. 검은 96 웰 평평한 바닥 플레이트의 각 우물에 4 % 포름알데히드50 마이크로 리터를 추가하고 각 우물에 약 50 개의 벌레를 전송합니다.
- 포름알데히드는 독성 화학 물질이며 주의하여 처리해야합니다.
