Encyclopedia of Experiments: Biology
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- 미세 주입에 의한 외염색체 DNA 어레이 생성 -- 형질 전환벌레 균주를 생성하는 가장 간단한 방법 -- 세포 분열 도중 안정적으로 전달되지 않는 유전 원소귀귀착되고, 따라서, 가변적인 상속비율 및 발현 수준을 전시합니다.
이렇게하려면, L4 형질 전환 벌레의 나이 동기화 된 인구로 시작, 이는 이전에 미세 주입에 의해 도입 된 엑스트라 염색체 배열을 수행하고 중력 성인으로 성장 할 수 있도록. 이 성인을 새로운 접시에 옮기고 각 접시에 적어도 30 개의 알이 있을 때까지 알을 낳을 수 있습니다. 성인을 제거하고 L4 단계에 도달 할 때까지 계란이 자랄 수 있습니다.
야간 복구 기간 후, 살아남은 벌레의 수를 계산합니다. 죽은 벌레의 작은 비율은 효율적인 조사를 나타냅니다.
- 통합될 형질대사의 전송속도를 평가합니다. 각 형질전환선의 경우 형광성 스테레오스코프 하에서 10개의 형광 중력 성인을 10개의 형광성 배양판에 선택합니다.
매일 자손 모니터링을 모니터링하여 어떤 발달 단계를 공동 주사 마커가 발현하고 가장 잘 관찰할 수 있는지 평가합니다.
통합을 위해 L4 애벌레 단계에서 동기화된 형질형 동물의 인구를 얻습니다. 5개의 배양 판에 30개의 형광 중력 성인을 선택하십시오.
자손이 L4 애벌레 단계에 도달할 때까지 벌레 인큐베이터에서 동물을 배양합니다. 뚜껑을 제거한 UV 크로스링커에 15~20개의 형광 형형 형질 형질 L4 동물을 포함하는 각 플레이트를 배치합니다.
회복을 위해, 조사된 벌레를 섭씨 15도에서 하룻밤 동안 배양한다. 살아있는 동물의 수를 확인합니다.
