Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Başlamak için, 10 zebra balığı embriyosunu, bir transfer pipet yardımıyla, 20 mililitre su ile dolu bir behere aktarın. Şimdi, embriyoları bir deney için gereken uygun açık karanlık döngü altında 28 santigrat derecede büyütün. Sonra, larvaları kuyu plakalarına aktarın. Her kuyunun yüzmek için yeterli alan sağlamak için bir larva içerdiğinden emin olun.
Şimdi her kuyuyu tamamen suyla doldurun. Kuyu plakasını davranışsal kayıt odasına yerleştirin ve video izleme yazılımı kullanarak larva hareketini izleyin.. Larvalar, artan stres seviyeleri nedeniyle anormal bir ışık ve karanlık döngüye maruz kaldıklarında karanlıkta artan hareket ve ışıkta hareket azalması sergiliyor. Bir başlangıç döneminin son dakikasında kat edilen ortalama mesafe ile sonraki dönemin ilk dakikası arasındaki farkın hesaplanması bize balığın fotomotor tepkisini anlatıyor.
Bu protokolde, kafeine maruz kalan zebra balığı ve şişko minnow larvalarındaki fotomotor yanıtı inceleyeceğiz. İlk olarak, deneysel balıkları içeren kuyu plakasını davranışsal kayıt odasına yerleştirin. Ardından, daha önce geliştirilen izleme protokolünü açın. Video izleme görüntüleyicide, tüm larvaların görünür olduğundan, her kuyuda sadece bir larva bulunduğundan ve kuyuların tanımlanmış gözlem alanlarıyla hizalandığından emin olun.
Ardından, Deney ve Yürüt'e tıklayın. Verilerin adını ve kaydetme konumunu belirtin ve önceden tanımlanmış görüntüleme alanlarının tümünü vurgulamak için Birkaç Canlı Görüntü simgesine tıklayın.
