Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- ראשית, מניחים דג מורדם עם הצד הגבי פונה כלפי מעלה לתוך ספוג רטוב מראש. לפני electroporation, להזריק חומר גנטי לתוך רקמת היעד, במקרה זה, חלק של המוח קדימה שנקרא telencephalon. הבא, לשים כמות קטנה של ג'ל אולטרסאונד על הראש.
עכשיו, לחץ את האלקטרודות בעדינות על הראש ולנהל כמה פולסים של זרם חשמלי. הזרם יוצר נקבוביות זמניות בקרום הפלזמה של תאים electroporated והופך אותם חדירים. הזרם גם מקל על התנועה של חלקיקים טעונים שלילית, כגון פלסמידים ביטוי DNA או RNAi oligonucleotides נוכח בסביבה, לתוך התאים.
- לכסות את הדג telencephalon עם כמות קטנה של ג'ל אולטרסאונד. להסיר את הספוג מן הפליטה להגדיר לטבול את הצד הפנימי של טיפים אלקטרודה לתוך ג'ל אולטרסאונד. הם סיימו.
