Visualisera proteiner och Makromolekylär av negativa Stain EM: från Grid förberedelse till Image Acquisition

Visualisering protein prover av negativa bets elektronmikroskopi (EM) har blivit en populär strukturell analys metod. Det är användbart för kvantitativ strukturell analys, såsom att beräkna en 3D-rekonstruktion av molekyler som studeras, och även för kvalitativ undersökning av kvaliteten på proteinet förberedelser. I denna artikel presenterar vi detaljerade protokoll för att förbereda EM nät, färgning provet och visualisera provet i ett elektronmikroskop. Nybörjare kan följa dessa protokoll lätt och att använda negativa fläcken EM som rutin analys, utöver andra biokemiska analyser för att utvärdera deras protein prover.