Общая цель следующего эксперимента заключается в выявлении кардиотропных антител в плазме пациентов с дилатационной кардиомиопатией или другими заболеваниями сердца с аутоиммунным фоном. Это достигается путем предварительной мини-иммуноабсорбции плазмы пациента на колонках со сферами anti IgG для очистки иммуноглобулина G на втором этапе. Вентрикулярные кардиомиоциты изолируют из взрослых крыс линии Wistar, что создает клеточную основу для данного биоанализа.
Затем кардиомиоцитам дают время прикрепиться к покровным стеклам камеры, после чего их окрашивают URA 2:00 AM для обеспечения возможности наблюдения за внутриклеточными транзиентами кальция во время сокращений; далее тестируют IgG пациента, чтобы изучить его влияние на сократительную способность кардиомиоцитов. Результаты позволяют определить, содержит ли IgG пациента тропные антитела, основываясь на изменениях сократимости и транзиентов кальция в изолированных кардиомиоцитах. Основным преимуществом данного метода по сравнению с существующими, такими как стандартные иммуноанализы для обнаружения антител, является его независимость от конкретного антигена и возможность дифференцировать стимулирующие и блокирующие антитела.
Демонс