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Chapters
- 00:05Title
- 01:13Seeding of U2OS-based Cyclin B-SNAP Reporter Cells
- 03:38Staining of Reporter Cells with SNAP Substrate
- 05:34Measurement of Fluorescence Intensity
- 07:07Analysis of Proteolytic Profiles using Scan^R
- 09:15Results: Cyclin B Kinetics during Mitosis
- 10:31Conclusion
Métaphase anaphase de transition est déclenchée par l'anaphase de promotion de complexe (APC / C) en fonction de l'ubiquitination et la destruction subséquente de la cycline B. Ici, nous avons mis en place un système qui, à la suite pulse-chase étiquetage, permet de suivre la cycline B protéolyse dans des populations de cellules entières et facilite la détection des interférences par le checkpoint mitotique.
Tags
ProteolysisCyclin BSingle Cell LevelWhole Cell PopulationsChromosome DistributionGenetic StabilitySpindle Assembly Checkpoint (SAC)Mitotic Surveillance MechanismAPC/C Subunit Cdc20SecurinMitotic ExitChromosome SeparationImproper Chromosomal AttachmentSAC SignalingAPC/CCdc20MicrotubulesSpindle DisruptionArtificial Effects
