الهدف العام من هذا الإجراء هو استقصاء نقطة تفتيش تلف الحمض النووي DNA باستخدام مستخلصات بويضات xip كنظام نموذجي. أولاً، يتم تحضير مستخلص منخفض السرعة من بويضات xip. ثم يتم تحضير كروماتين حيوانات منوية تالف باستخدام طرق إتلاف الحمض النووي DNA مثل MMS والأشعة فوق البنفسجية UV light.
قم أيضاً بتحضير البنية التي تحاكي تلف DNA. يتم استخدام a T 70 لتحفيز نقطة تفتيش تلف DNA في LSE باستخدام كروماتين الحيوانات المنوية التالف أو a T 70. وفي النهاية، يمكن لنتائج لطخات البروتين (blots) أن توفر رؤى حول نقطة تفتيش تلف DNA التي يتوسطها a TR check one في مستخلص بيض Xenopus.
أهلاً بكم. معكم CH Y من قسم الأحياء في جامعة UNC Charlotte. سنعرض لكم اليوم كيفية استخدام مستخلص الصديد كنظام نموذجي لدراسة مسارات إشارات تلف نقطة التقنية.
يمكن لهذه الطريقة أن تساعد في الإجابة على أسئلة جوهرية في مجال عدم الاستقرار الديناميكي، مثل كيفية تنشيط نقطة تفتيش تلف DNA. هذا البروتوكول مخصص لتحضير كل من مستخلص بويضات opus والكواشف المحفزة لنقطة تفتيش تلف DNA، وتحليل نقطة تفتيش تلف DNA و xap. وتعد هذه التقنيات قابلة للتكيف مع مجموعة متنوعة من طرق إحداث تلف DNA، بما في ذلك four NQO و etoposide.
لبدء دراسة نقطة تفتيش تلف الحمض النووي DNA، دعونا نبدأ. لتحفيز وضع البيض لدى إناث الضفادع، يتم حقن الأكياس اللمفاوية الظهرية بـ 100