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Introdução a Pipetas e Pipettors Sorológicos
 
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Introdução a Pipetas e Pipettors Sorológicos

Overview

A pipeta sorológica é frequentemente utilizada em laboratório para transferência de volumes mililitros de líquido, de menos de 1 ml para até 50 ml. As pipetas podem ser estéreis, plásticas e descartáveis ou esterilizáveis, vidros e reutilizáveis. Ambos os tipos de pipetas usam um auxílio-tubulação, para a aspiração e distribuição de líquidos. Diferentes tamanhos de pipetas podem ser usados com o mesmo auxílio pipeta para uma variedade de ensaios experimentais. Por exemplo, pipetas sorológicas são úteis para misturar soluções químicas ou suspensões celulares, transferir líquidos entre recipientes ou cuidadosamente camadas de reagentes de diferentes densidades. Com atenção ao nível de líquido aspirado e dispensado, as pipetas sorológicas podem ser ferramentas úteis para a transferência de volumes precisos de mililitros de soluções em laboratório. Este vídeo discute a forma como esse volume pode ser lido em uma pipeta sorológica, como funciona um auxílio pipeta e muitas aplicações diferentes para o uso de uma pipeta sorológica.

Procedure

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A pipeta sorológica é um instrumento de laboratório quase onipresente usado para a transferência de volumes mililitros de líquido. Pipetas sorológicas normalmente têm gradações ao longo de seus lados para medir a quantidade de líquido sendo aspirado ou dispensado.

Estes instrumentos são mais comumente utilizados com um dispensador de pipeta, o que facilita a transferência de líquido através da criação de um vácuo parcial. O mesmo dispensador de pipeta pode ser usado com uma variedade de tamanhos de pipetas sorológicas, dependendo da quantidade de volume que você deseja transferir.

As pipetas sorológicas são tipicamente plásticas, estéreis e descartáveis ou vidros, esterilizados e reutilizáveis.

Todas as pipetas sorológicas requerem o uso de um dispensador de pipeta para a transferência de líquidos.

O distribuidor de pipetas nega a necessidade de um pesquisador realizar a antiga técnica de pipetação bucal. Este método primitivo de transferência de líquidos não é recomendado, pois pode levar à entrada de líquido na cavidade oral e causar alguns efeitos colaterais adversos graves.

Um tipo de dispensador, a lâmpada pipeta oferece a menor quantidade de precisão e geralmente é usada com pipetas sorológicas de vidro para transferir volumes não específicos de líquido.

A bomba de pipeta também é usada com pipetas de vidro e permite uma regulação mais precisa do volume líquido. As bombas de pipeta são particularmente úteis para dispensar volumes repetidos de solução.

O pipet-aid é o tipo mais comum de dispensador de pipeta. É composto por vários componentes-chave: o cone do nariz é onde a pipeta se prende e também é onde o filtro – que protege o interior da tubulação-aid do líquido e mantém a esterilidade – está localizado.

Na alça do pipet-aid dois gatilhos podem ser encontrados; o gatilho superior é pressionado para aspirar líquidos, o fundo para dispensar.

Muitas vezes os pipet-aids virão equipados com configurações que controlam a velocidade com que o líquido é dispensado. Por exemplo, o instrumento pode ser definido para dispensar líquido usando ar forçado, em uma configuração de explosão, e sem força, em um ajuste de gravidade.

Embora alguns pipet-aids tenham cabos, a maioria é alimentada por bateria.

Alguns pipetas-aids são equipados com um suporte que se prende à alça, permitindo que o auxílio-pipeta repouse de lado sem ter que remover a pipeta.

Como mencionado, diferentes tamanhos de pipetas sorológicas podem ser usados com o mesmo dispensador de pipeta, dependendo do volume de líquido sendo transferido, de apenas um décimo de mililitro até dezenas de mililitros.

Primeiro, selecione a pipeta do tamanho adequado para o volume que deseja transferir. Em seguida, abra seu invólucro na parte superior e manuseando a pipeta apenas acima das marcas de gradação, conecte-a ao dispensador antes de remover o resto do invólucro.

Em seguida, segurando o distribuidor de pipeta em uma mão, remova a tampa do líquido que deseja aspirar. Em seguida, mantendo a pipeta vertical, pressione suavemente o gatilho superior para aspirar lentamente sua amostra.

Use as marcas de gradação ao longo da lateral da pipeta para medir o volume que você irá transferir. Observe que o volume é lido na gradação ao longo da parte inferior do menisco, não na parte superior do líquido.

Agora, sem tocar na ponta da pipeta contra quaisquer superfícies não estéreis, dispense cuidadosamente o líquido no recipiente selecionado.

Tenha cuidado ao usar pressão suave ao aspirar líquidos, especialmente quando usar pipetas sorológicas de menor volume para evitar contaminar o filtro e a amostra ou danificar o auxílio-tubulação. O não uso do cuidado ao operar um auxílio-tubulação irritará muito os membros mais experientes do laboratório que podem precisar desmontar e reparar este instrumento. Ao aspirar volumes maiores e ao dispensar, uma pressão mais firme pode ser usada no gatilho para uma transferência mais rápida da solução.

Por fim, certifique-se de descartar a pipeta corretamente depois de terminar de transferir o líquido.

Agora que você sabe como operar uma pipeta sorológica, vamos dar uma olhada mais de perto em algumas aplicações de laboratório comuns.

Distribuir células uniformemente em uma solução é um passo importante ao emplacamento oucultura de células. Use uma pipeta sorológica para uma mistura suave e eficaz de suspensões celulares, bem como para misturar soluções químicas e reagentes.

Após o isolamento ou tratamento de culturas celulares experimentais, as pipetas sorológicas podem ser úteis para transferir colônias inteiras de células para expansão ou análise experimental posterior.

Outro uso comum para pipetas sorológicas é a camada cuidadosa de reagentes para a criação de gradientes de densidade como um gradiente ficoll, que é usado para purificar células do plasma de sangue.

Você acabou de assistir a introdução do JoVE a pipetas sorológicas.

Neste vídeo revisamos: o que é uma pipeta sorológica e quando é usada, como um pipet-aid ajuda a aspirar e dispensar volumes mililitros de líquido, e algumas aplicações diferentes da sua pipeta sorológica. Obrigado por assistir e por favor lembre-se dos perigos.de pipetting bucal!

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