Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Science Education
General Laboratory Techniques

A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 20 seconds.

 
Click here for the English version

Un'introduzione al lavoro nel cofano

Overview

Le cappe sono una classe comune di strumenti, che fungono da involucro protettivo per vari tipi di esperimenti di laboratorio. Servono a proteggere i campioni sperimentali dall'ambiente, nonché a proteggere il ricercatore da campioni pericolosi o infettivi. "The Hood" è un termine che può includere panche a flusso laminare, cappe aspiranti, nonché cappe per la coltura di tessuti o armadi di biosicurezza. Tutte le cappe funzionano in base al principio del flusso laminare e hanno gli stessi componenti di base, tra cui un'anta della finestra e una barriera protettiva in vetro, una superficie di lavoro non porosa e una presa d'aria e uno scarico. Il tipo di cappuccio utilizzato dovrebbe essere scelto in base all'esperimento. Ad esempio, le cappe aspiranti in genere proteggono l'utente e non l'ambiente sperimentale. Al contrario, i banchi a flusso laminare proteggono l'esperimento, ma non l'utente, e quindi possono essere utilizzati per mantenere sterili i campioni sperimentali, quando non rappresentano una minaccia. Se sia l'utente che l'esperimento devono essere protetti, è possibile utilizzare una cappa per la coltura di tessuti o un armadio di biosicurezza. Le cappe per colture tissutali mantengono la sterilità delle linee cellulari, mentre gli armadi di biosicurezza forniscono protezione durante le procedure che utilizzano agenti infettivi Una volta scelta l'unità appropriata per un esperimento, l'utente deve indossare dispositivi di protezione appropriati e seguire tutte le procedure di sicurezza necessarie. Questo video discute il principio del flusso laminare, come viene utilizzata la cappa e discute i diversi tipi di procedure che dovrebbero essere eseguite in ciascun tipo di cappa.

Procedure

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Le cappe sono una classe comune di strumenti, che fungono da involucro protettivo per vari tipi di esperimenti di laboratorio.

Oltre a schermare i campioni sperimentali dall'ambiente, le cappe proteggono anche il ricercatore da campioni pericolosi o infettivi.

"The Hood" è un termine che può includere panche a flusso laminare, cappe aspiranti e cappe per la coltura di tessuti o armadi di biosicurezza. Scegli sempre quello giusto per i tuoi esperimenti.

La maggior parte delle cappe funziona utilizzando il principio di base del flusso laminare, che è il flusso d'aria snello e ininterrotto in strati paralleli.

A differenza del flusso turbolento, il flusso laminare consente all'aria di fluire intorno agli oggetti all'interno della cappa in modo da mantenere la sterilità dell'ambiente di lavoro e contenere i fumi chimici nocivi.

Le cappe possono essere progettate per avere un flusso laminare orizzontale o verticale.

Nelle cappe a flusso orizzontale, la presa d'aria viene filtrata e l'aria scorre orizzontalmente dal retro dell'unità, verso la parte anteriore dell'unità.

Nelle cappe a flusso verticale, l'aspirazione viene filtrata, ma l'aria viene tirata via verticalmente dall'utente e lo scarico viene nuovamente filtrato mentre esce. Queste unità di solito mantengono la sterilità dell'ambiente di lavoro.

Tutte le unità di cappa hanno gli stessi componenti di base. Un componente principale è l'anta della finestra. Questa è una barriera di vetro protettiva scorrevole che funge da scudo contro schizzi e fumi. Può essere orientato orizzontalmente o, per alcune unità, verticalmente.

La superficie di lavoro all'interno della cappa è generalmente un materiale non poroso come l'acciaio inossidabile.

Tutte le unità hanno anche una presa d'aria, dove l'aria viene portata nell'unità, e uno scarico. La posizione dell'aspirazione e dello scarico varia a seconda del tipo esatto e del modello di cofano.

Adiacente all'anta, un pannello si trova spesso con controlli per regolare la presa d'aria, le luci del cofano e altre caratteristiche. Alcuni modelli sono dotati di una luce UV, che può essere utilizzata per disinfettare l'unità quando non è in uso.

Non lasciare mai l'UV acceso mentre qualcuno è in laboratorio o usa il cappuccio! Ciò può causare danni alla retina, ustioni cutanee e aumento del rischio di cancro.

Dopo aver scelto il tipo di cappuccio corretto per il tuo esperimento, assicurati di utilizzare l'equipaggiamento di protezione individuale appropriato o; PPE. Indossa guanti, occhiali e una maschera se necessario.

Se è necessario un ambiente asettico per l'esperimento, ad esempio all'interno di una cappa di coltura di tessuto, iniziare spruzzando la superficie del cappuccio con il 70% di etanolo. Questo disinfetta la superficie e evapora rapidamente senza lasciare residui.

Inoltre, assicurati di spruzzare ogni oggetto con il 70% di etanolo, poiché è posizionato nel cofano, per mantenere un ambiente pulito.

Quando si posizionano oggetti nel cofano, tenere presente il flusso d'aria. Non bloccare il flusso d'aria nella parte posteriore e lasciare 6 pollici chiari davanti al cofano.

Assicurarsi di utilizzare l'altezza dell'anta appropriata durante l'esperimento per mantenere un flusso d'aria laminare ottimale. La maggior parte delle cappe sono dotate di un allarme che si spegne se l'altezza dell'anta non è ottimale.

Quando la cappa non è in uso, ricordarsi sempre di chiudere l'anta, per risparmiare preziose energie di laboratorio, e risorse istituzionali.

Ora che abbiamo visto come lavorare all'interno di un cappuccio, esaminiamo alcuni diversi tipi di cappuccio e le molte procedure che possono essere eseguite all'interno di ciascun tipo di cappa.

Un tipo specifico di cappa è la Cappa Fume. Come suggerisce il nome, questo tipo di unità dovrebbe essere utilizzato per procedure che producono fumi tossici o che coinvolgono reagenti chimici che emanano fumi tossici. Le cappe aspiranti proteggono l'utente, ma non l'ambiente sperimentale, quindi i campioni biologici NON sono protetti in queste unità e la sterilità NON viene mantenuta.

Una cappa aspirante dovrebbe essere utilizzata per la fissazione, così come la lavorazione dei tessuti e le tecniche di istologia. Queste procedure in genere coinvolgono sostanze chimiche tossiche e corrosive.

Un altro tipo di cappuccio è il banco a flusso laminare. Questa unità protegge l'esperimento, ma non necessariamente l'utente. Queste unità possono utilizzare il flusso orizzontale o verticale e possono essere utilizzate per esperimenti BSL1 senza rischi biologici noti, come la coltura cellulare senza rischio di esposizione agli agenti patogeni.

Spesso, le dissezioni vengono eseguite all'interno di un banco a flusso laminare, quando la sicurezza dell'utente non è un problema, ma la sterilità dei tessuti campione è importante.

Armadi di biosicurezza o cappe per la coltura di tessuti proteggono sia l'utente che l'esperimento. Come avrai già intuito, la coltura tissutale viene in genere eseguita all'interno del cappuccio della coltura tissutale. Queste unità mantengono la sterilità dello spazio di lavoro sperimentale; tutta l'aria è ad alta efficienza particolato sono filtrati, o HEPA, filtrato, in quanto entra ed esce dall'armadio.

Molti laboratori di ricerca biomedica hanno cappe per la coltura dei tessuti dotate di un sistema di aspirazione sottovuoto per aspirare i mezzi di coltura dei tessuti.

Esistono vari tipi di armadi di biosicurezza e cappe per la coltura di tessuti; controlla per vedere quale valutazione BSL del tuo cappuccio prima di iniziare un nuovo esperimento.

Hai appena visto l'introduzione di JoVE al lavoro nel cofano.

In questo video, abbiamo parlato del principio alla base di come funziona una cappa, o flusso laminare, i componenti di una tipica cappa, come lavorare all'interno dello strumento e diversi tipi di cappuccio.

Grazie per aver guardato, e non dimenticare di chiudere la fascia!

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Nessun conflitto di interessi dichiarato.

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter