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광학 현미경 소개

Overview

가벼운 현미경은 많은 다른 필드에 있는 연구원이 견본을 천 배 의 그들의 원래 크기만큼 확대하기 위하여 이용된 계기입니다. 가장 간단한 형태로, 샘플을 확대하는 투명 렌즈와 빛을 비추는 광원으로 구성됩니다. 그러나 대부분의 가벼운 현미경은 훨씬 더 복잡하고 현미경 자체의 몸 내및 목표 및 안구와 같은 구성 요소에서 모두 엄격하게 제어 된 치수를 가진 수많은 미세 조정 렌즈가 있습니다. 이 비디오에서는, 빛 현미경의 주요 구성 요소가 기술되고 그들의 사용 및 기능은 상세히 설명됩니다. 배율, 초점 및 해상도의 기본 원칙도 도입됩니다. 기본 광 현미경 작업은 시료에 빛을 가져오고 광원이 최상의 품질의 이미지를 생성하기 위해 올바른 강도, 방향성 및 형상을 보장하는 것으로 시작됩니다. 다음으로, 샘플은 제대로 확대되어야하며 관심 영역을 보기 위해 초점을 맞추어야합니다. 얼룩진 세포나 스테인드 되지 않은 세포 및 조직의 보기, 표본의 작은 세부 사항을 해결하고, 심지어 미크론 규모에 복잡한 절차를 지원하기 위해 수술 중 관심 영역을 확대하는 등 가벼운 현미경 검사법을 위한 많은 실용적인 응용 프로그램이 있습니다.

Procedure

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빛 현미경은 연구 표본을 확대하는 데 사용되는 기기입니다. 빛 현미경은 과학적 조사자가 원래 크기의 1000 배에서 물체를 볼 수 있도록 할 수있는 귀중한 분석 도구입니다. 당신이 볼 수 있듯이, 빛 현미경은 몇 가지 매우 기본적인 원칙을 통해 작동하지만 실험실에서 표본을 시각화하기위한 거의 무한한 응용 프로그램이 있습니다.

그 이름은 빛 현미경이 샘플에 응축기 렌즈에 의해, 초점을 맞출 수있는 빛을 생산하는 광원이 필요합니다.

표본을 비추는 빛은 객관적인 렌즈로 알려진 렌즈에 도달하여 반전되거나 거꾸로 뒤집힌 확대된 이미지를 만듭니다. 안구 또는 안구 렌즈는 영상을 더욱 확대하여 눈이 받는 이미지를 더욱 돋보이게 합니다. 추가 광학 요소는 이미지를 오른쪽으로 하는 광 경로에 도입하여 눈이 올바른 방향으로 볼 수 있도록 할 수 있습니다. 여기에서 보는 것과 같이 다중 렌즈를 이용하는 현미경은 복합 현미경으로 불립니다.

복합 현미경에서, 총 배율은 안구 렌즈 또는 눈조각의 배율에 의해 객관적인 렌즈의 배율을 곱하여 계산된다. 40X 목표 렌즈와 10X 안구 렌즈를 갖춘 총 배율은 400배입니다.

현미경의 밑에 객체의 크기를 추정하는 것을 돕기 위하여는, 안면 망막, 이미지 위에 투영되는 규모를 이용할 수 있습니다. 배율이 높을수록 접안 렌즈 망막의 진드기 자국은 낮은 배율에서 볼 때보다 더 작은 거리를 나타냅니다.

배율 외에도 현미경 광학의 또 다른 측면은 해상도입니다. 해상도는 범위 아래의 두 개체 사이의 가장 짧은 회수 거리를 나타냅니다. 이러한 문자의 머리가 점점 더 명확해지고 해상도가 증가함에 따라 둘 사이의 가장 짧은 관찰 거리가 줄어듭니다.

빛 현미경의 주요 구성 요소는 목표, 안구, 표본 단계 및 표본 홀더, 광원, 필드 다이어프램, 응축기 및 조리개, 그리고 거칠고 미세한 초점 노브를 포함한다.

목표는 현미경의 배율 및 해상도의 대부분을 책임있습니다. 그들은 목표가 변경될 때 초점 평면이 동일하게 유지되는 방식으로 회전 코피스에 장착되어 있습니다. 목적은 배율, 숫자 조리개, 또는 N.A., 필요한 침지 매체의 유형, 시료를 장착할 때 사용해야 하는 커버슬립 두께 및 작업 거리-샘플의 초점 평면에 렌즈 요소의 끝에서 거리로 표시될 수 있다.

N.A.로 정의된 수치 조리개는 현미경 목표가 빛을 얼마나 잘 수집할 수 있는지에 대한 척도입니다. 높은 N.A. 목표는 경사 각도에서 빛이 통과할 수 있도록 허용하고 낮은 N.A.목표는 더 직접적인 조명을 필요로 합니다. 목표의 해상도는 빛의 파장을 감안할 때 숫자 조리개에서 계산할 수 있습니다.

광원, 필드 다이어프램, 조리개 및 응축기는 모두 빛을 생산하고 시료에 전달할 책임이 있습니다.

광원은 일반적으로 광 강도를 제어하도록 조정할 수 있는 저전압 할로겐 전구입니다.

그런 다음 빛은 다양한 필터를 통과하고 조명할 시편의 영역을 제어하는 필드 다이어프램으로 전달됩니다.

다음은 시편에 밝고 가벼운 콘덴서이며, 시편 주위의 조명 원뿔은 응축기에 의해 제어되며 사용되는 목표에 따라 조정되어야 합니다.

광 현미경을 사용하기 시작하려면 현미경 단계에 관심 영역을 포함하는 샘플을 배치하여 목표보다 직접 중앙에 배치하고 스테이지 클립을 사용하여 제자리에 고정하십시오.

다음으로 광원을 켜고 가장 낮은 전원 으로 전환합니다.

다음으로, 거친 조정 노브의 초기 조정을 사용하여 z 방향으로 이동한 다음 미세 조정 노브를 회전시켜 물체를 날카로운 초점으로 끌어들이는 저전력 목표를 집중합니다. 이 렌즈를 손상 시킬 수 있습니다 으로 목표슬라이드 또는 단계에 충돌 하지 않도록 주의.

그런 다음 노브를 조정하여 슬라이드를 x 및 y 방향으로 이동시키면서 눈 조각을 통해 보는 것으로 관심 영역을 찾습니다. 낮은 배율에서 더 높은 배율로 이동함에 따라 시야의 크기가 크게 줄어듭니다.

높은 전력으로 이동하기 전에 관심 영역에서 가장 낮은 전력 목표를 중심으로 원하는 시편을 찾을 가능성이 크게 높아진다.

샘플이 저전력에 위치하고 초점이 되면 이미지를 수집하는 데 사용되는 더 높은 전력 목표로 이동합니다.

다이어프램 자체가 시야 바로 바깥에 있도록 먼저 필드 다이어프램을 조정하여 조명의 품질을 최적화합니다.

그런 다음 콘덴서 다이어프램을 조정하여 설정이 사용 중 목표의 숫자 조리개와 일치되도록 합니다.

마지막으로 포커스를 다시 조정합니다. 이번에는 미세 조정 노브만 사용합니다.

이제 표본의 이미지를 찍을 준비가 되었습니다.

광 현미경 검사법은 광범위한 표본을 시각화할 수 있는 잠재력을 가지며, 화합물 현미경의 다양한 구성은 많은 다른 용도에 맞게 존재한다.

여기서, 당신은 외과 현미경으로 작동하도록 준비하는 연구원을 참조하십시오. 이 현미경은 일반적으로 이동식 팔에 일시 중단되고 입체, 그들은 빛이 뷰어와 현미경에 장착 된 카메라를 전달 할 수 있다는 것을 의미. 이 외과 현미경은 신장 이식 절차에서 사용 되 고, 쥐에서.

이 클립에서, 당신은 해부 현미경을 통해 찾고 연구원을 참조하십시오, 추가 해부에 대한 완벽한 drosophila 애벌레를 따기 동안, 신경 근육 접합을 연구 할 수 있도록 신체 벽 근육을 노출하기 위해.

여기서 는 미세 주입 기술에 대비하여 단계 아래에 객관적인 목표를 가지고 있는 반전된 화합물 현미경을 볼 수 있습니다. 체세포 핵 전달로 알려진 이 절차는 형질전환 동물을 생성하고 클론을 만드는 중요한 방법입니다.

당신은 단지 가벼운 현미경 검사법에 JoVE의 소개를 보았다.

이 비디오에서 우리는 검토 : 현미경이 무엇인지, 어떻게 작동하는지, 많은 구성 요소, 조정하는 방법 및 품질 이미지를 얻는 방법. 시청해 주셔서 감사합니다!

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