Journal
/
Biology
/
Um protocolo para exibição Fago e Affinity Seleção Usando Iscas proteína recombinante
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
A Protocol for Phage Display and Affinity Selection Using Recombinant Protein Baits

Um protocolo para exibição Fago e Affinity Seleção Usando Iscas proteína recombinante

DOI:
10.3791/50685-v

•

12:36 min

•

February 16, 2014

•

, ,
1Department of Horticulture,University of Kentucky

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:14Growing Bacterial Host (BLT5403) for Titering
  • 02:15Affinity Selection
  • 08:13Titering
  • 09:41Plaque Isolation
  • 10:59Results: Typical Titer and PCR Results for Affinity Selection over an Appropriate Bait
  • 12:12Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

A exibição em fagos é uma técnica poderosa para captura de proteínas ou fracções de proteínas que interagem com uma molécula de interesse imobilizada. Uma vez tomada uma decisão sobre o tipo de biblioteca de cDNA de fagos para criar e tela, o protocolo descrito aqui permite a seleção de afinidade eficiente levando à identificação de interagentes.

Tags

Phage DisplayAffinity SelectionRecombinant Protein BaitsProtein-protein InteractionsCDNA LibraryAffinity Selection ProtocolPhage TiterNegative ControlsAmpliconsFalse PositivesViral Contamination

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Um método para produção de proteína recombinante em células de inseto mCD1d.

Usando o sistema de fracionamento GELFREE 8100 para Fracionamento baseada no peso molecular com Recovery Fase Líquida

Primer-Free Seleção Aptamer usando uma biblioteca de DNA Aleatório

Peptídeos de Phage Biblioteca Mostrar modular a expressão de genes em células mesenquimais e potenciar a osteogênese em defeitos ósseos unicorticais

Automated interação hidrofóbica Seleção coluna de cromatografia para uso na purificação de proteínas

Um protocolo para Computer-Based Estrutura de Proteínas e de Previsão de Função

Identificação de parceiros de proteína Interagir utilizando Tandem purificação por afinidade

A fase líquida ensaio de captura de afinidade usando pérolas magnéticas para estudar interação proteína-proteína: O Exemplo Poliovírus Nanobody-

Um protocolo para a identificação de interações proteína-proteína Baseado<sup> 15</sup> Etiquetagem N Metabólica, imunoprecipitação, Quantitativa Espectrometria de Massa e Affinity Modulação

De alto rendimento de purificação de afinidade com tag Proteínas Recombinantes

Read Article