Overview
חקירות רבות המבוצעות בעכברים (שרירים) דורשות ניהול של סוכן ניסיוני לחיה. לדוגמה, זה עשוי להיות עניין לבדוק את היעילות של טיפול מסוים, כדי לגרום למצב פתולוגי, או לנהל הרדמה או טיפול פליאטיבי. על מנת להבטיח אספקה בטוחה ויעילה, חשוב לשקול מגוון גורמים לפני מתן הטיפול.
וידאו זה, אשר סוקר ניהול סוכן בעכבר, מתחיל על ידי הדגשת מאפיינים לשקול, כגון צמיגות, מינון, ו palatability, בעת תכנון הממשל של סוכן ניסיוני. הדיון הבא מתמקד בשיטות הזרקה, כולל תיוג הרכיבים המבניים של המזרק והמחט, כיצד לפרש מד מחט, ושיטות ריסון עכבר בטוחות לאתרי הזרקה נפוצים. הוראות מפורטות מסופקות לביצוע זריקות תת עוריות (SC/SubQ), תוך-עוריות (IP) וריד זנב (IV) בעכברים. יתר על כן, יישומים של טכניקות אלה, כמו גם נתיבי ניהול חלופיים נדונים.
Procedure
ניסויים רבים תלויים בניהול סוכנים לעכברים. לעתים קרובות, סוכנים אלה מוצגים כדי לבדוק את השפעתם על תהליך ביולוגי. סוכנים יכולים גם לשחק תפקיד חשוב בהכנת בעלי חיים לניסויים. בסרטון זה נדון בשיקולים חשובים לניהול סוכנים ניסיוניים, כלים להעברת סוכנים, כמה מסלולים ספציפיים של ניהול, ויישומים של טכניקות חיוניות אלה.
אז אילו גורמים יש לקחת בחשבון בעת תכנון ניהול של סוכן ניסיוני?
הראשון הוא המינון המתאים. מחושב בדרך כלל ביחס למשקל החיה, מתן המינון הנכון של סוכן הוא קריטי.
גם את תוואי הניהול חשוב לשקול. מאפיינים כגון החוכמה של הסוכן, צמיגות, הסכום שיש לנהל, רקמת היעד, ואת קצב ההפצה הרצוי יקבעו אילו מבין מסלולי הניהול הזמינים הרבים עליך לבחור. בסרטון זה נתמקד בהזרקה, שהיא אחת השיטות היעילות ביותר של אספקת סוכן.
לפני שנדון כיצד לבצע זריקה, בואו להכיר את הכלים העיקריים עבור הטכניקה.
נתחיל עם המזרק. נוזלים מוחזקים בתוך החבית, אשר מסומן כדי לאפשר מדידות נפח מדויקות. הבוכנה מתאימה לחבית ומשמשת להנעת תנועה של תכולתה. לבסוף, קצה המזרק הוא האתר של התקשרות של רכזת המחט. בקצה הנגדי של פיר המחט תמצאו קצה משופע. תיזהר, זה מאוד חד!
רכזות מחט מקודדות בצבע כדי לשקף את גודלן, או "מד", עם מספרי מד גבוהים יותר המציינים מחטים קטנות יותר. מדים נבחרים על סמך מסלול המסירה הרצוי: ככל שהאזור קטן או רגיש יותר, כך המחט הנדרשת קטנה יותר.
לאחר בחירת המחט והמזרק המתאימים לניסוי שלך, למשוך את הסוכן לתוך הקנה על ידי משיכה בחזרה על הבוכנה. בועות אוויר מוזרקות יחד עם הסוכן יכול לשבש רקמות ולפגוע החיה הניסיונית. לכן, הפוך את המזרק ולהעיף בעדינות את החבית, כך שכל בועות יתקדמו לכיוון הקצה ולברוח. במידת האפשר, לגרש כמה סוכן עודף כדי לוודא את הבועות מוסרים לחלוטין.
עכשיו שהמזרק שלך נעול וטעון, אתה כמעט מוכן לבצע זריקה!
לפני שתתחילו, חשוב לצייד את עצמכם בציוד המגן האישי המתאים, כולל כפפות. טיפול נכון בבעלי חיים הוא גם חיוני, ומשתנה מעט בהתאם לאתר ההזרקה בשימוש.
עבור זריקות תת עוריות, אשר לעתים קרובות ממוקדים מתחת לדרמיס של הצוואר של החיה, עכברים מרוסנים על ידי "שרבוט". ראשית, להחזיק את החיה בזנב ולאפשר לו לאחוז במכסה הכלוב. לאחר מכן, תפס בחוזקה את הקשקוש, מרים אוהל עור על כתפי החיה.
המחט צריכה להיות מוכנסת בבסיס העור אוהל, והסוכן ויתר על לחץ מוצק, עקבי על הבוכנה. הנוזל המוזרק ייספג לאט למחזור הדם.
זריקות תוך-זמניות לחלל הגוף נספגות בקצב דומה לבליעה. כדי לגשת לבטן, להפוך את החיה המוזנחת מעל, ולתחוב את הזנב בבטחה מתחת לזרת שלך.
לאחר מכן, מחלקים נפשית את בטנו של החיה לארבעה רבעים ומכניסים את המחט לרביע השמאלי או הימני התחתון. החל לחץ מוצק ועקבי על הבוכנה כדי לספק עד כמה מאות מיקרוליטרים של סוכן. לחלופין, זריקות תוך ורידי מאפשרות אספקה יעילה ומערכתית יותר של סוכן ניסיוני.
זריקות IV מבוצעות בדרך כלל בעורקי הזנב. ראשית, עכברים מתחממים תחת מנורת חום במשך כמה דקות, מה שגורם לוורידים להתנפח והופך את החדרת המחט לקלה יותר. כדי לשמור על העכבר יציב במהלך ההזרקה, מניחים אותו לתוך מרסן פלסטיק, מחליק את הזנב דרך חור מיוחד בגב.
זיהוי הכלי הנכון הוא הכרחי עבור זריקות תוך ורידי מוצלחות. הקפד למצוא אחד משני הוורידים caudal משני צדי הזנב; לא העורק בחלק התחתון של הזנב.
מחזיק את הצד משופע המחט למעלה, להכניס אותו לתוך הווריד. אם המחט ממוקמת כראוי, הזרקה תגרום לווריד להשתנות מכחול כהה ללבן חיוור בצבע כמו הסוכן נע דרך הכלי.
לאחר כל זריקה, להשליך את המחט לתוך מיכל חדה biohazardous מבלי לסכם. לעולם אל תשימוש חוזר במחט, שכן טיפים יכולים להיות קהים ולגרום לפגיעה בעכבר.
עכשיו שאתה מכיר שיטות הזרקה נפוצות, בואו נסתכל על כמה יישומים מעשיים של משלוח סוכן ניסיוני.
בניסויים רבים, עכברים נגועים בפתוגן ספציפי כדי לחקור התקדמות המחלה, כמו גם אינטראקציות מארח-פתוגן. לדוגמה, זריקות תת עוריות של חיידקים עמידים לאנטיביוטיקה גורמות ל נגעים שגודלם הוא קריאה לתחבולה של הפתוגן. לחלופין, זריקות לתוך footpad יכול לשמש הדמיה חיה של גיוס תאים חיסוניים לאתר של זיהום.
מודלים עכבר שימושיים גם לחקר התקדמות הסרטן וטיפולים. כדי ליצור מודלים אלה, זריקות ניתן להשתמש כדי במהירות וביעילות לגרום גידולים ממאירים בעכברים, הן באמצעות משלוח של תרכובות מסרטן השתלת תאים סרטניים לתוך רקמות מארחות.
עם זאת, הזרקה לא תמיד נדרש עבור משלוח סוכן. חיסון תוך-נאואלי, למשל, יכול לשמש לניהול סוכן מעניין לריאות כדי לחקות וללמוד התקדמות מחלות בדרכי הנשימה. מסלול אחר, gavage, מאפשר ניהול ישיר של סוכן לקיבה כדי להבטיח מנונים מדויקים ומדויקים לא ניתן להשיג באמצעות טיפול מבוסס מזון או מים.
הרגע צפית בסקירה של JoVE על החדרת סוכנים ניסיוניים לעכבר. בסרטון זה סקרנו גורמים שיש לקחת בחשבון בעת בחירת סוכן ניסיוני, כלים ואסטרטגיות עבור זריקות עכבר, וכמה יישומים של טכניקות קריטיות אלה. תודה שצפיתם!
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
לא הוכרזו ניגודי אינטרסים.
