Medicine
This content is Open Access.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli
Chapters
Summary August 25th, 2020
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Bu çalışmada farelerde hızlandırılmış ateroskleroz indüksiyonu için invaziv bir prosedür açıklanmaktadır. Elektrik veya kriyo kaynaklı yaralanma yöntemi ile karşılaştırıldığında, mekanik kaynaklı yaralanma revaskülarizasyon tedavileri sonrası restenoz insan durumunu taklit eder ve ilgili moleküler mekanizmaların çalışması için idealdir.
Transcript
Bu işlemin genel amacı, yaralanma yanıtında yer alan moleküler mekanizmaları incelemek için farelerde revaskülarizasyon tedavisi sonrası restenozun insan durumunu taklit etmektir. Bu tekniklerin en önemli avantajları, son derece tekrarlanabilir ve kolayca gerçekleştirilebilir olmasıdır, küçük hayvan modellerinde yöntemi uygulamak için hatta en az deneyime sahip araştırmacı sağlayan. Prosedürü gösteren Adelina Curaj, laboratuvarım için doktora sonrası olacak.
Hiperlipidemi indüklemek için, altı ila sekiz haftalık 18-20 gram Apoe nakavt fareler bir aterojenik diyet bir hafta önce cerrahi işlem ve aterosklerotik plak analizi kadar beslemek. Ameliyat günü, parmak sıkışmayanıt eksikliği doğruladıktan sonra, ventral boyun bölgesinde anestezili fare tıraş ve Betadine ile maruz kalan cilt dezenfekte. Trakea üzerinde boynun ortanca bölgesinde bir santimetrelik deri kesi yapmak ve trakeal bölgenin tam bir görünüm elde etmek için iki yağ organları ayırın.
Kas tabakası açık tutmak için bir retraktör kullanarak, karotis arter ortaya çıkarmak ve iç ve dış karotis arter çatallanma alanı görünür kadar vagus sinir ve juguler ven arter ayırmak için keskin kavisli forceps kullanın. Gevşek, aort kemer karotis arter proksimal altında yedi santimetre uzunluğunda 0-5 ipek sütür yerleştirin, bir gevşek çatallanma noktasına yakın dış karotis arter etrafında 1.5 santimetre uzunluğunda 0-7 ipek sütür yerleştirilir, ve bir gevşek yerleştirilmiş 1.5 santimetre uzunluğunda 0-7 ipek sütür döngü mümkün olduğunca bifurcation distal olarak. Internal karotis arter altında başka bir açık 1.5 santimetre uzunluğunda 0-7 ipek sütür yerleştirin.
Sonra hayvanı saat altı pozisyonunda başıyla yerleştirin. Hemen, sıkıca iç karotis arter ve dış karotis arter üzerinde distal sütür üzerinde dikiş döngüleri kapatın. Ortak karotis arter yoluyla kan akışını durdurmak için 0-5 sütür uçlarını çekmek için hemostat forceps kullanın.
Küçük makas kullanarak, iki döngüler arasında dış karotis arter distal damar çapı distal yarısı küçük bir arteriotomi yapmak ve insizyon yoluyla ortak karotis arter içine% 0.9 sodyum klorür bir damla ile nemlendirilmiş bir 14 inç alkol cilalı esnek guidewire eklemek. Y-insizyon sırasında arteriyel patlamayı önlemek için, dikkatlice parlatılmış bir kılavuz tel kullanın. Üç kez dönerken damar boyunca tel geçerek endotel denudation elde, sonra sıkıca dış karotis arter proksimal döngü kapatın ve kan akışını geri yüklemek için ortak ve internal karotis arterler etrafında dikişleri kesti.
Sonra, retractors kaldırmak ve fizyolojik pozisyona kas tabakası ve iki yağ organları dönmek. Metal klipslerle deriyi kapatın, ardından farenin tamamen bükülene kadar izleyerek kızılötesi ışık altında sol tarafında toparlanmasına izin verin. Neointima oluşumu Movat boyama kullanılarak değerlendirilebilir.
Cerrahın becerisine bağlı olarak 70, 000 ve 100, 000 mikron kare arasında değişen toplam plak boyutu, daha sonra uygun yazılım kullanılarak her örnek için hesaplanabilir. Geliştirilen plak anlık restenosis benzer, hangi ağırlıklı olarak çoğalmış ve orta düz kas hücrelerinin göç oluşur. Düz kas hücresi içeriği plak yaklaşık% 30-40 temsil ederken makrofajlar yaralı damarın neointima içinde bulunan toplam hücre sayısının% 15-25 makyaj.
Re-endotelizasyon genellikle üç hafta sonra% 80-90 ulaşır ve dört hafta sonra neredeyse tamamlanmış olmalıdır. Gelişimi sırasında plak büyümesini takip etmek için, analiz deneysel soruya bağlı olarak tel yaralanmasından sonra birden fazla zaman noktasında tekrarlanabilir. Bir kez hakim, bu teknik düzgün yapılırsa 15 dakika içinde tamamlanabilir.
Bu işlemi yaparken, kurutmayı önlemek ve tel manipülasyonu kolaylaştırmak için cerrahi alanın sürekli olarak sulu olması gerektiğini unutmamak gerekir.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.