Der Kiefernfadenwurm, Bursaphelenchus xylophilus (Steiner und Bührer) Nickelle, ist eine der zerstörerischsten invasiven Arten, die das Welken und schließlich den Tod von Kiefern verursacht. Es wird angenommen, dass dieser pathogene Nematode in den USA beheimatet ist, aber er wurde in mehrere Länder transportiert, darunter China, Japan, Südkorea und Portugal. Kürzlich wurde es auch in Spanien gemeldet, das Millionen von Kiefern mit enormen wirtschaftlichen Verlusten tötete und die Waldproduktion und die ökologische Stabilität bedrohte1-5.
Sobald eine Wirtskiefer von Kiefernfadenwürmern befallen ist, vermehren sich Tausende von Millionen Nachkommen schnell im Stamm. Dies führt zu einer Xylemdysfunktion, die zum Welken und schließlich zum Absterben des Wirtsbaumsführt 6. Derzeit gibt es jedoch keine wirksame Möglichkeit, diese Krankheit zu kontrollieren. Das Paarungsverhalten könnte eine wichtige Rolle für die hohe Fruchtbarkeit dieses Fadenwurms spielen7. Wir untersuchten daher das Paarungsverhalten von B. xylophilus im Labor und versuchten, einen effektiven Weg zu finden, um seine Paarung zu stören und seine Fruchtbarkeit zu verringern.
Dieses Protokoll soll die detaillierten Methoden vorstellen, wie man die jungfräulichen adulten Tiere von B. xylophilus erhält und wie man das Paarungsverhalten mit einem Videorekorder und einem Stereomikroskop beobachtet und analysiert. Dieses Protokoll kann auch als Referenz für Verhaltensstudien an anderen Nematoden verwendet werden.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, das Paarungsverhalten des Kiefernfadenwurms, Bursaphelenchus xylophilus, zu beobachten. Diese Methode kann dazu beitragen, psychologische Studien über den Fadenwurm voranzutreiben. Sie befasst sich speziell mit der Beobachtung des Paarungsverhaltens des Kiefernfadenwurms.
Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass jungfräuliche adulte Tiere gewonnen werden können, was es viel einfacher macht, das Paarungsverhalten der adulten Tiere zu beobachten. Die Implikationen dieser Technik erstrecken sich ausschließlich auf die breitere Untersuchung von Nematoden, da sie ein ähnliches Verhalten im Lebenszyklus aufweisen. Denn die Demonstration dieser Methode ist von entscheidender Bedeutung, da der Erwerb von jungfräulichen adulten Nematoden schwierig ist, da die Einschränkungen durch Entwicklungsnematoden Übung erfordern und es nicht einfach ist, Männchen von Weibchen in jungen Jungtieren im frühen ersten Stadium genau zu unterscheiden.
Um Kiefern-Nematoden zu züchten, bereiten Sie zuerst Kartoffel-Dextrose-Agar-Platten vor. Um eine Platte zu impfen, stanzen Sie ein Stück Pilzmatte mit einem Durchmesser von 10 Millimetern aus einer Betr