Il nematode del pino, Bursaphelenchus xylophilus (Steiner e Buhrer) Nickle, è una delle specie invasive più distruttive, che causa l'appassimento e la morte dei pini. Si ritiene che questo nematode patogeno sia originario degli Stati Uniti, ma è stato trasportato in diversi paesi, tra cui Cina, Giappone, Corea del Sud e Portogallo. Recentemente, è stato segnalato anche in Spagna, uccidendo milioni di pini con enormi perdite economiche e minacciando la produzione forestale e la stabilità ecologica1-5.

Una volta che un pino ospite viene infettato dai nematodi del pino, migliaia di milioni di prole si propagano rapidamente all'interno del tronco. Ciò provoca una disfunzione dello xilema, con conseguente appassimento e infine la morte dell'albero ospite6. Tuttavia, attualmente non esiste un modo efficace per controllare questa malattia. Il comportamento di accoppiamento potrebbe svolgere un ruolo importante nell'elevata fecondità di questo nematode7. Abbiamo quindi studiato il comportamento di accoppiamento di B. xylophilus in laboratorio, cercando di trovare un modo efficace per disturbare il suo accoppiamento e diminuire la sua fecondità.

Questo protocollo ha lo scopo di introdurre i metodi dettagliati su come ottenere gli adulti vergini di B. xylophilus e su come osservare e analizzare il comportamento di accoppiamento utilizzando un videoregistratore e uno stereomicroscopio. Questo protocollo può essere utilizzato anche come riferimento per studi comportamentali di altri nematodi.

L'obiettivo generale di questa procedura è osservare il comportamento di accoppiamento del nematode del pino, Bursaphelenchus xylophilus. Questo metodo può aiutare a far progredire gli studi psicologici sul nematode. Si occupa in particolare dell'osservanza del comportamento di accoppiamento del nematode del pino.

Il vantaggio principale di questa tecnica è che si possono ottenere adulti vergini, il che rende molto più facile osservare il comportamento di accoppiamento degli adulti. Le implicazioni di questa tecnica si estendono puramente allo studio più ampio dei nematodi, perché hanno comportamenti simili nei cicli di vita. La dimostrazione di questo metodo è fondamentale, poiché l'acquisizione di nematodi adulti vergini è difficile perché i vincoli dei nematodi dello sviluppo richiedono pratica e non è facile distinguere con precisione i maschi dalle femmine nei giovani all'inizio del primo stadio.

Per coltivare i nematodi del pino, preparare prima le piastre di agar destrosio di patate. Per inoculare una piastra, prendi a pugni un pezzo di tappetino fungino con un diametro di 10 millimetri da un tappetino per betritus senaria e mettilo al centro di una nuova piastra PDA. Coltiva