Сосновая нематода, Bursaphelenchus xylophilus (Steiner and Buhrer) Nickle, является одним из самых разрушительных инвазивных видов, вызывающих увядание и возможную гибель сосен. Считается, что эта патогенная нематода родом из США, но она была завезена в несколько стран, включая Китай, Японию, Южную Корею и Португалию. Недавно сообщалось о нем и в Испании, в результате которого погибли миллионы сосен, что привело к огромным экономическим потерям и поставило под угрозу производство лесов и экологическую стабильность.

Как только сосна-хозяин заражается сосновыми нематодами, тысячи миллионов потомков быстро размножаются внутри ствола. Это вызывает дисфункцию ксилемы, приводящую к увяданию и, в конечном итоге, к гибели дерева-хозяина6. Однако в настоящее время не существует эффективного способа борьбы с этим заболеванием. Брачное поведение может играть важную роль в высокой плодовитости этой нематоды7. Поэтому мы исследовали брачное поведение B. xylophilus в лаборатории, пытаясь найти эффективный способ нарушить его спаривание и снизить его плодовитость.

Этот протокол предназначен для представления подробных методов получения девственных взрослых особей B. xylophilus, а также наблюдения и анализа брачного поведения с помощью видеорегистратора и стереомикроскопа. Этот протокол также может быть использован в качестве эталона для поведенческих исследований других нематод.

Общая цель этой процедуры состоит в том, чтобы наблюдать за брачным поведением сосновой нематоды Bursaphelenchus xylophilus. Этот метод может помочь продвинуться в психологических исследованиях нематоды. В частности, речь идет о наблюдении за брачным поведением сосновой нематоды.

Главное преимущество этой методики заключается в том, что можно получить девственных взрослых особей, что значительно облегчает наблюдение за брачным поведением взрослых особей. Последствия этого метода распространяются исключительно на более широкое изучение нематод, потому что они имеют схожее поведение в жизненных циклах. Для демонстрации этого метода крайне важно так как приобретение девственных взрослых нематод затруднено, так как ограничения развития нематод требуют практики, а точно отличить самцов от самок у молодых особей на ранних стадиях первой стадии непросто.

Для культивирования сосновых нематод сначала готовят картофельную декстрозу агаровыми пластинками. Чтобы сделать прививку пластине, пробейте кусок грибкового мата диаметром 10 миллиметров из мата betritus senaria и поместите его в середину новой пластины PDA. Культивируйте грибковый коврик в течение пяти дней при температуре 25 градусов Цел